SDS裂解液

特别提示：包括SDS裂解液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：SDS裂解液
英文名称：SDS Lysis Buffer

产品货号：SDS裂解液
产品规格：100ml

SDS裂解液是以SDS为主要组分的裂解液，具有较强的裂解强度，另含有sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、ChIP等实验。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

注意事项
1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用SDS裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

(一) 细胞样品
1）融解SDS裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。如果用于ChIP，建议6孔板每孔细胞至少加200μl裂解液。

（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解SDS裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。

除了SDS裂解液,，我公司还供应以下相关产品：



名称：镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶)
货号：BTN100101
规格：2mL
本产品就是专门用于纯化带有His标记的蛋白质实验。基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法，其原理是用基因重组的方法使待纯化蛋白的N 端或C 端携带一段His序列(一般是6个His)，然后利用偶联了Ni离子的琼脂糖与His的亲和作用而将His-标记蛋白与其他蛋白质分开，与Ni-琼脂糖结合的蛋白最后用咪唑溶液洗脱即可。Ni-琼脂糖中的Ni与蛋白质中His 结合示意图如下：


产品特点：
1．即开即用，非常方便。
2．介质为交联的琼脂糖，可以反复使用。
3．Ni偶联牢固，含有5个Ni 螯合位点，Ni密度达到20-40μmol/mL。
4．结合量大，每mL介质可以结合20-30mg的蛋白质。
5．专一性强，一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
6．有效pH范围广，在pH3-10之间均可使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

相关参数：

特点	基团密度高,载量大,分辨率高,使用方便
基质	6%的交联琼脂糖凝胶
配体	Ni2+
配体密度	20-40 umol/ml
吸附载量	20-30mg蛋白/ml
介质颗粒大小	45～165um
最大流速	300cm/h
PH范围	3～10，在位清洗时pH范围可到2～11
保存温度	2～8℃
保存液体	20%乙醇