植物膜蛋白提取试剂盒

特别提示：包括植物膜蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物膜蛋白提取试剂盒
英文名称：Plant membrane protein extraction kit

产品货号：植物膜蛋白提取试剂盒
产品规格：50T/100T

跨膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
我司植物膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。植物膜蛋白提取试剂盒可以从各种植物中提取膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用我司其他货号的试剂盒(HR0177)。也可以将最后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理(货号HR0389)。

储存条件：蛋白提取液、溶解液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。
使用前请仔细阅读产品说明书
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的
版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。
使用安全： 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
1．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
2．禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
3．样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
4．最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
5.实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
1．使用方便。
2．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4．将蛋白提取的时间缩短至1小时。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂耗材和仪器
● PBS ● 吸头、离心管 ● 移液器 ●冰盒 ●离心机 ● 涡旋振荡器 ●冰箱

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．试剂准备：
每500μl冷的抽提液A中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
【注】：
① 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
② 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的100-200mg 植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
3.加入500μl提取液A，用匀浆机充分匀浆
【注】：
① 也可液氮研磨处理后加入提取液A
② 没有液氮研磨条件也可以直接加入冷的提取液A在冰上研磨处理。
③ 如果组织样本很细小，可以剪碎后直接加入提取液2～8℃振荡，可以不用匀浆器。
4．将匀浆移入另一个预冷的干净离心管中2～8℃条件下振荡1～2小时。
● 如果没有2～8持续振荡条件，也可直接置于2～8℃冰箱静置1～2小时，中间每隔10分钟涡旋
振荡混匀即可。
5.将提 取液在2～8℃条件下12000g离心5分钟，取上清。
6．在上清中加入5μl提取液B，充分混匀。
7.在37℃水浴10分钟。
8.在37℃温度下，1000g离心3分钟。
【注】：
● 此步骤必须37℃条件下离心。
● 如果离心机不可控温，可以不离心，延长上一步骤水浴时间，至溶液分层清晰即可。
或者在室温条件下离心，缩短离心时间至1分钟。
9．此时溶液分为两层，小心移除上层，留下管底部下层大约30～50μl液体。
【注】：
● 下层为粘稠状液体。
●含叶绿体的植物样本下层膜蛋白为黄绿色。通常不影响下游应用。
10．用50～150μl冷的膜蛋白溶解液C溶解下层溶液，即得膜蛋白样品。
11．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析：
●蛋白浓度低？
膜蛋白丰度比较低，需要尽可能加大细胞上样量。处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白？
建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂A中含有干扰Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford 法定量。
● 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。

除了植物膜蛋白提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒
货号：BTN91203
规格：30次
本产品是专门用于小量真核培养细胞中制备胞浆蛋白.细胞质是真核细胞活动的重要场所，很多与新陈代谢和信号传递的蛋白质都存在于细胞质中，这些蛋白就叫胞浆蛋白。

产品特点：
1.一步式操作，整个提取制备过程简便，只需要半小时。
2. 实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞，也可以用于新鲜动物组织细胞。
4. 温和裂解法，制备的胞浆蛋白能保持天然活性，可以直接用于活性检测、蛋白浓度测定、各种蛋白质电泳等后续研究。

储存条件：低温运输，4℃保存、有效期一年。

使用方法：
将培养到55%-65%覆盖率的体外培养的真核细胞用胰酶法处理后转移到离心管中，离心30秒，在细胞沉淀中加入0.5mL溶液A，悬浮后冰浴10分钟，振荡10分钟，混匀后室温离心10秒，上清即为细胞浆提取物，可以直接放-70℃保存或直接使用。

名称：彩色预染蛋白分子量标准(15-120kD)
货号：YT622
规格：200μl|600μl|3ml
本品包含了从15kD到120kD共7种纯化的预染蛋白质，其中15kD和70kD条带为红色，其余条带为蓝色(参见下图)，适合作为SDS-PAGE或Western的蛋白质分子量标准。特别适合在Western时使用，这样在转膜后可以直接并清楚地观察到转膜效果。须注意右图所示分子量仅适用于常规的Tris-Glycine凝胶。根据上样孔的大小，本彩色预染蛋白质分子量标准通常每次上样3-5微升，即可在电泳时、电泳后或转膜后观察到非常清楚的蛋白条带。

产品特点：
1. 提供了两条鲜艳的红色条带(15kD和70kD)，有利于快速准确辨认蛋白质分子量标准的条带。同时本产品中含有类似于溴酚蓝的指示性红色染料，电泳时会呈现红色条带并处于最前沿。
2. 提供了从15kD到120kD共7条条带，条带清晰，分子量范围比较宽，蛋白分子量比对比较方便。
3. 本彩色预染蛋白质分子量标准已经配制在1×SDS-PAGE上样缓冲液中，可以直接使用，无需煮沸。


蛋白条带包括：15kD,25kD,35kD,45kD,55kD,70kD,120kD

注意事项：
1. 本彩色预染蛋白质分子量标准不可在100℃加热或煮沸，并不得加热至40℃以上，室温融化后混匀即可直接使用。
2. 本彩色预染蛋白质分子量标准用1X SDS-PAGE上样缓冲液配制，不适用于非变性PAGE胶。
3. 预染蛋白质分子量标准每一批次的分子量大小可能有所不同，属正常现象。请参考随产品所附的说明书确定精确的分子量。

储存条件：-20℃，有效期一年。

名称：10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液
货号：SY0353
规格：500ml
Tris-Glycine-SDS Running Buffer，常用作蛋白质SDS-PAGE的电泳缓冲液。本缓冲液是10倍浓缩液，在使用前只需用去离子水稀释到1×工作液即可。

Tris-Glycine-SDS Running Buffer [1×]:25 mM Tris, 192 mM Glycine, 0.1% SDS, pH 8.3。

储存条件：室温。

名称：甲叉双丙*酰胺
货号：SY0363
规格：100g
甲叉双丙*酰胺（Bis-Acryamide），一种白色晶体化合物，生化实验中常作为一种交联剂与丙*酰胺（Acrylamide）一起在催化剂（如核黄素、过硫酸*(代"铵")）的作用下用于聚丙*酰胺凝胶（PAGE胶）的配制，包括SDS-PAGE胶等，主要用于蛋白或核酸的分离。根据丙*酰胺
和甲叉双丙*酰胺的浓度不同，可形成具有不同大小孔径的凝胶，从而分离不同大小的蛋白或核酸。

中文别名：双丙*酰胺；N,N’-亚甲基双丙*酰胺；
英文别名：N,N´-Methylene-Bis-Acrylamide
CAS：110-26-9
分子式：C7H10O2N2
分子量：154.17
外观：白色粉末
纯度：＞99%
pH（1%, 0.1M NaCl）@25℃：5.0
溶解性：溶于水
储存条件：室温，避免受潮
结构式：


注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）甲叉双丙*酰胺单体具有毒性，很容易通过皮肤吸入，操作时请务必小心谨慎。
3）建议条件允许的实验人员，购买我司的一系列升级产品，不同程度降低与丙*酰胺/双丙*酰胺接触的可能性。升级系列产品：
a）30% /40%丙*酰胺/双丙*酰胺溶液（浓度比：19:1，29:1，37.5:1）；
b） Fast-UVTM荧光PAGE凝胶预混液（胶浓度：8%，10%，12%，15%），仅需凝胶成像（紫外）即可观察到蛋白的电泳情况，无需凝胶染色；
c）12孔固定浓度或者梯度预制胶（胶浓度：8%，10%，12%，15%；8-16%，4-20%）。

名称：变性蛋白预制胶(15%)
货号：QN1284
规格：10块
本预制胶是百奥莱博公司开发的高性能低成本聚丙*酰胺预制凝胶。预制胶将凝胶事先配制好，使用者拿来即可上样进行电泳，减去了用户自配凝胶的麻烦，节约了大量的时间。

本预制胶具有如下特点：
★ 特制凝胶和缓冲液配方，分辨率高，条带清晰，电泳效果极佳
★ 保存期长，4℃储存达到18个月胶夹打开极为轻松，无需起撬工具
★ 兼容目前市场各种电泳槽, 如BIORAD，天能和君意东方等
★ 可用于SDS变性及非变性电泳
★ 10%, 12%, 15%及4-15%梯度等多种不同浓度供选择;1.5mm胶厚度;
★ 电泳时间短，在150V电压下， 电泳40-50分钟即可完成
★ 出售时免费附送足量的电泳缓冲液。
★ 玻璃电泳板蛋白吸附率低，电泳效果更好。

本预制胶参数：
★ 胶板尺寸：10.0×8.5×0.45cm
★ 凝胶尺寸：8.0×7.4×0.15cm
★ 浓度：15%
★ 分离范围：50-10KDa
★ 孔数:10wells
★ 上样量：35ul
★ 应用：Western blot

储存条件：4℃，有效期18个月

名称：尿蛋白防腐剂
货号：HR0396
规格：1ml/5ml/20ml
尿蛋白防腐剂采用最新混合配方，能有效防腐，固定尿中有机成分，防止细胞被破坏，保持尿液的化学成分不变。常用于尿生化检验、细胞计数、蛋白测定，例如检测尿17-酮类固醇、17-羟皮质类固醇胺、尿素、钙及磷酸盐等。

储存条件：室温保存。
有效期：两年。

使用方法：
每100ml尿液中加1ml防腐剂混匀即可。

名称：Bradford蛋白定量试剂盒
货号：GL1486
规格：500T|1000T
用途：
分析总蛋白含量，其优点是蛋白中存在的盐、溶剂、金属螯合剂、缓冲液等物质影响很小。

注意事项：
Bradford蛋白定量试剂盒是常用的蛋白浓度检测方法之一，当Bradford染色液(考马斯亮蓝)和蛋白在酸性条件下结合时，最大吸光值波长立刻由465 nm转移至 595nm，同时颜色由褐色转为蓝色，通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值，推算出蛋白浓度。



储存条件：室温，12个月