ER2566化学感受态细胞

特别提示：包括ER2566化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：ER2566化学感受态细胞
英文名称：ER2566 Chemically Competent Cell

产品货号：ER2566化学感受态细胞
产品规格：10×100μl/50×100μl

ER2566感受态细胞为lon和ompT蛋白酶缺陷菌株。
膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。
ER2566感受态细胞采用特殊化学试剂制作，可用于DNA的化学转化，经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
F-λ-fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sμlA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS)endA1 [dcm]
操作说明：
1.取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

除了ER2566化学感受态细胞,，我公司还供应以下相关产品：



名称：多粘菌素B硫酸盐
货号：BTN120699
规格：5mL
本产品为浓度100mg/mL的多粘菌素B硫酸盐溶液。多粘菌素B硫酸盐(硫酸多粘菌素B ；Aerosporin；Mastimyxin)，分子式：C55H96N16O13·2H2SO4，分子量：1385.63，CAS号：1405-20-5。多粘菌素B为多肽类抗生素，可以改变膜结构使小分子物质泄漏而抑制革兰氏阴性菌的生长。

储存条件：低温运输，4℃避光保存，有效期6个月。

名称：Myc荧光素酶报告基因质粒
货号：YT450
规格：1μg
Myc报告基因质粒是用于检测Myc转录活性水平的报告基因质粒。Myc质粒是以pGL6-TA质粒为模板，在其多克隆位点插入了多个Myc结合位点(E-box DNA binding element)，可以高灵敏度地检测Myc的激活水平。Myc可以和Max形成异源二聚体，结合到E-box DNA binding element，启动促进细胞增殖的基因转录。

pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。

Myc质粒的主要信息如下：
 

Base pairs	5647
Myc response element	26-61
Minimal TA promoter (pTA)	84-106
luc2 reporter gene	148-1800
SV40 late poly(A) signal	1835-2056
SV40 early enhancer/promoter	2104-2522
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region	2547-3341
Synthetic poly(A) signal	3366-3414
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3481-3500
ColE1-derived plasmid replication origin	3738
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4529-5389
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5494-5647
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5596-5615

Myc质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. Myc质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。
3. 可以激活Myc的试剂，可以用作Myc报告基因检测时的阳性对照。

储存条件：-20℃。