精子快速染色液(快速改良巴氏法)

特别提示：包括精子快速染色液(快速改良巴氏法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：精子快速染色液(快速改良巴氏法)
英文名称：Quick Sperm Stain Kit

产品货号：精子快速染色液(快速改良巴氏法)
产品规格：250ml×4|50ml×2；100ml×1



除了精子快速染色液(快速改良巴氏法),，我公司还供应以下相关产品：



名称：碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法，适用于细胞样本)
货号：SNM374
规格：可染20-30张片
细胞中碱性磷酸酶（cAKP）在碱性的缓冲液中，催化底物水解，生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联，生成不溶性的偶氮染料，沉着于有cAKP 活性的部位。适用于血涂片、骨髓涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片脱蜡梯度入水后。

SNM374可染 20～30 张涂片，组分如下：
试剂一：固定液 10ml×1 瓶。
试剂二：底物液
① 甲液，溶剂5ml×2 瓶；
② 乙粉，粉剂×2 支；
③ 丙粉，粉剂×2 支。
试剂三：复染液
① 苏木素染液，5ml×1 瓶；
② 甲基绿染液，5ml×1 瓶。
附赠疏水膜 1 张。
本试剂盒应置室温密封保存，有效期6个月。

试剂配制：
底物应用液的配制：临用时将1 支乙粉剂倒入1 支甲溶剂中，用微量移液器取少许液体打入小离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复2～3 次，使二者充分混合，完全溶解后才可加入1 支丙粉剂，再充分摇动使其完全溶解，配成底物应用液待用。底物应用液要新鲜配制，用多少配多少。

操作步骤：
① 固定：新鲜血涂片、骨髓涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片用固定液固定3 min 左右。（石蜡切片脱蜡梯度入水后不需固定）
② 加底物应用液：固定后的样本，滴加新鲜配制的底物应用液盖满样本部分，加盖疏水膜，放置湿盒中，避光37℃孵育15min，水洗。（此时覆盖在样本上的疏水膜会遇水掉下）
③ 复染：趁湿用复染液(苏木素或者甲基绿，两者取其一)染3min 左右。水洗，镜检。

染色结果：
血涂片及骨髓涂片的观察：选涂片中厚薄均匀的部位滴加香柏油用油镜检查，灯光适中。细胞核呈紫色，cAKP 阳性者胞浆中出现红至红棕色颗粒，有些为棕褐色或咖啡色颗粒，其强度可按Kaplow 记分法表示。
0 胞浆内无红色或无咖啡色；
1 弥散的红色并偶见红色或咖啡色颗粒；
2 弥散的红色，有中等量的红棕色颗粒；
3 显著的红色，有较多的红棕色或咖啡色颗粒；
4 显著的红色并有粗大的红棕色或咖啡色、深咖啡色颗粒充满胞浆。

名称：细胞膜完整性检测试剂盒
货号：HR8616
规格：500T
E42细胞膜完整性检测试剂盒是利用E系列探针进行细胞染色的试剂盒。本试剂盒中的E42 细胞染色探针为红色荧光标记的细胞探针，具有550/683nm 的最大激发/发射波长。
E42探针是对细胞膜损伤细胞进行染色的试剂，不能穿透正常细胞膜，只有当细胞膜完整性受到影响时才可以染色细胞，进入细胞后会与细胞内蛋白质紧密结合，可有效标记膜不完整细胞。

储存条件：染料-20℃避光保存；避免反复冻融；稀释液2-8℃保存。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● HBSS ● 离心机 ●荧光显微镜/激光共聚焦显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
●染色后立即进行分析。

1．细胞染色
1.1对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的染色液。于生长状态下孵育5分钟～10分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。
【注】:
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。

1．2对于悬浮细胞
1)离心，吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育5分钟～10分钟(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。
【注】:
●对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2．观察结果：
在荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。最大激发/发射波长为550/680nm。