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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
400
- 英文名:
Total RNA Extraction Reagent(Trizol Method)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
100ml
特别提示:包括总RNA抽提试剂(Trizol法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:总RNA抽提试剂(Trizol法)
英文名称:Total RNA Extraction Reagent(Trizol Method)
产品货号:总RNA抽提试剂(Trizol法)
产品规格:100ml
本试剂是一种用于动植物细胞或组织及细菌总RNA抽提的试剂。本产品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步骤完全相同。
本试剂的颜色和TRIzol相同,加入氯*(代"仿")后上层呈无色,下层呈紫红色,便于吸取上层水相。
本试剂可以抽提长达15 kb的RNA,也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。裂解细胞或和组织共匀浆时,可以保持样品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解。
每一百万细胞用Trizol抽提可得5-15μg RNA;每毫克组织用Trizol抽提可得1-10μg RNA。产量因细胞和组织不同而异。每100ml本试剂可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。抽提两个样品约需一小时。抽提所得RNA可直接用于Northern,点杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase protection assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(deep sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
注意事项:
1. 需自备氯*(代"仿"),异丙*(代"醇"),DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPC(ST036),DEPC水(YT528)可向百奥莱博订购。
2. 所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或Milli-Q级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。
3. 使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA,推荐先加入适量Trizol,并裂解样品后冻存。
4. 必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。
5. Trizol含有毒物质苯*(代"酚"),避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触Trizol,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
6. Trizol抽提总RNA的同时,理论上也可抽提蛋白和DNA,但未经测试。有兴趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步骤进行操作。
储存条件:4℃,有效期一年。
除了总RNA抽提试剂(Trizol法),,我公司还供应以下相关产品:
名称:非冻型拭子病毒保存液
货号:BTN91103
规格:100mL
拭子是一种常用的病毒样品取材方法,与PCR相结合可以用于快速病毒性疾病的检测。但是,并不是每个样品采集处都能进行PCR检测,因此需要对采集到的病毒拭子样品进行运输。本产品就是为这一需要而开发的拭子病毒保存液。
产品特点:
1.低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
2.适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
3.可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
4.可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
5. 试剂本身安全环保无毒。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
1.在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL 旋盖塑料管 里(一级容器)。
2. 鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有 3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
3. 咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有 3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
4. 直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者 姓名。
5. 将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
6. 将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
7. 将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
8. 采集的标本若不能在 24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
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文献和实验RNA 的 trizol,好像贵一些。 2. 关于配套试剂: Trizol 法提取 RNA 是要用到氯仿、异丙醇和乙醇的。氯仿现在是违禁品,不大好买(我们学校试剂科现在不卖),所以买的时候要让试剂上给送,一般他们都能免费给送。氯仿遇光易分解,试剂商给你的时候应该是遮光的。异丙醇虽然没有特殊说明,但我查的据说也是最好避光保存,不过这种试剂都是棕色瓶子,能遮蔽大部分的光线了。 3. 关于实验时的防护: RNA 很容易降解,所以实验时一般都要求口罩帽子的,避免组织的污染。不过以我的经验
RNA抽提指南(TRIZOL法) 注意事项: * 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。 * 使用灭菌的,一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA,避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探针的实验室可能用RNA酶A 或T1来降低滤纸上的背景,因而某些非一次性的物品(如自动吸管)可能富含RNA酶。 * 在TRIZOL 中,RNA 是隔离在RNA 酶污染之外的。而对样品
自己整理的protocol,希望对大家有所帮助! Preparations: 1. 高压2遍的物品及试剂:Ep管[大、中、小] 移液枪头[大、中、小] 0.1%DEPC[sigma]水—v/v, 室温静置过夜-高压2遍(大Ep管分装 后冻与-20℃) 2. 试剂:Trizol[invitrogen](4度) 100%无水乙醇(生产日期近,越久的挥发越多;及时盖盖) 氯仿(三氯甲烷CH3Cl3) 异丙醇 3. 其它:手套【需要勤换-防止RNA酶降解RNA】;口罩;冰盒
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