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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Tissue Stabilizer
- 库存:
237
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售动植物组织RNA稳定液现货供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:动植物组织RNA稳定液现货供应
规格:100ml
产地:国产|进口
编号:SY0267
英文名:Tissue Stabilizer
品牌:百奥莱博
RNA酶广泛存在环境中,很容易降解新鲜采取的动植物组织、血液、体液等样本中的RNA,从而使得研究人员在收集完新鲜样本需要做液氮速冻,或者立即进行RNA的纯化,给研究人员的户外工作带来很多不便。
动植物组织稳定液(Tissue Stabilizer)是专门开发用于稳定并保护采集样本内RNA的完整性,一种无毒溶液,可迅速渗入组织,灭活内源RNase。具有以下特点:
1)操作极其简便:只需要将新鲜组织切成合适大小(≤0.5 cm)的组织块,浸入5~10倍体积的本品中即可。2)稳定周期长:经本品浸渍的组织/细胞可在37℃保存1天,室温保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃长期保存。3)下游兼容性广:几乎兼容于所有的RNA分离方法,如Total RNA Extraction Reagent总RNA抽提试剂,以及商业化的几乎所有RNA抽提试剂盒,包括离心柱抽提法,磁珠纯化法等。4)应用性广:可用于多种动植物组织如脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、植物的茎叶等的保存,还可用于酵母、组织培养细胞等。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)经本品稳定液处理的样本还可做DNA的提取,甚至蛋白质的提取,但由于本品会变性蛋白质,因此不适合做天然蛋白的提取。
3)本本品稳定液室温保存过程中可能会产生一些沉淀,只需要在使用前放到37℃温育片刻,并摇晃使其重溶即可。
4)本本品稳定液仅适用于新鲜组织,不可用于冰冻组织。若需要保护冰冻组织内RNA的稳定性,可使用我司的本品-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液,即可在将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态,并进行RNA抽提的过程中,维持RNA的稳定性。
操作流程
1. 样品处理:
A. 动物组织:本品稳定液不会破坏动物组织结构的完整性,因此,已经浸入本品的组织平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块(≤0.5 cm大小),再重新放回本品稳定液中。另外,某些动物组织如骨头具有比较弱的液体渗透性,不适合用本品进行RNA保护。
使用:将组织切成合适的大小块(≤0.5 cm大小)后,加入5倍体积的本品稳定液。
B. 植物组织:植物组织天生具有的屏障如叶子表面的蜡层可阻碍本品稳定液的渗透,往往需要破坏这些屏障层从而允许溶液的浸透。对于许多柔软的植物组织如嫩叶,嫩茎等,本品可直接渗透且达到理想的RNA保护效果。
使用:将组织切成合适的大小块(≤0.5 cm大小)后,加入5倍体积的本品稳定液。
C. 组培细胞、白细胞:按照标准实验操作方法收集细胞(用PBS清洗1-2次)。之后往细胞内加入5~10倍体积的本品稳定液。
D. 酵母:收集大约108个细胞 (12,000 g,2 min),弃上清。加入0.5~1 ml的本品稳定液。长期保存时应将酵母细胞置于本品稳定液中,4℃放置1小时。然后离心收集细胞 (12,000 g,5 min),弃上清,再置于-80℃保存。
2. 样品保存:
A. -80℃保存:对于归档的样本建议-80℃保存,且效果最佳,样本可长期保存,-80℃条件下本品溶液也会结冻。
首先需要让样本4℃浸透过夜,然后再转移到-80℃。如果中间需要做样本的融化,建议取出4℃浸透过夜的组织或者离心收集细胞,然后再冻存在-80℃。之后,样本可直接放在室温融化,之后重新冻上,不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。
B. -20℃保存:也适用于归档样本的保存。样本不会在-20℃冻住,但可能会形成结晶。不会对后续RNA分离造成影响,样本可长期保存。
首先需要让样本4℃浸透过夜,然后再转移到-20℃。之后,样本可直接放在室温融化。重新冻上后不会造成RNA量的损失或者RNA完整性的破坏。
C. 4℃保存:大部分样品放到本品溶液中,稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。
D. 室温(25℃)保存:建议低温环境保存。若条件不允许,请将本品稳定液于冰上冷却几个小时,然后将样品浸入此溶液中,室温稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。
E. 37℃保存:纯化的RNA样本于37℃孵育24h,结构依然完整。
3. RNA提取:
注意:RNase失活的过程是可逆的,在样本使用前不要清洗掉本品稳定液。
A. 组织样本:直接用灭菌镊子从本品稳定液中取出组织块,然后用干净的吸水纸吸掉表面的液体。之后立即置于裂解液中匀浆。
B. 细胞样本:由于本品稳定液密度较大,此时需要使用大于普通介质的离心力。一般来说,保存在本品稳定液中的细胞能承受更高的转速,并维持细胞的完整性。大部分细胞能够承受离心速度 (5,000 g,5 min),收集细胞沉淀。注意:由于不同细胞承受离心力会有差异,建议先用少量的细胞进行离心速度承受性的测试。
C.之后进行后续的RNA抽提,兼容各种常见的RNA抽提试剂,以及商业化的RNA抽提试剂盒。
我公司的动植物组织RNA稳定液现货供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
BTN131017 乙酰化牛血清白蛋白 Bovine Serum Albumin, Acetylated
尿嘧啶 N-Acetyl-DL-Leucine 66-22-8
ARB13811 豚鼠促卵泡素(FSH)Elisa定量检测 Guinea pig follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
ARB12941 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)酶联免疫定量检测 Mouse platelet-derived growth factor soluble receptor α,pdgfsr-α ELISA KIT
115-39-9 溴酚蓝 Bromphenol Blue
BTN130698 3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G帽结构类似物 RNA Cap Structure Analogs
DP115 N96快速质粒提取试剂盒
ARB14196 山羊Toll样受体3(TLR3)定量分析
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 Sodium lignosulfonate 9012-33-3
井冈霉素 E-64 37248-47-8
84366-81-4 核黄素腺嘌呤二核苷酸二钠 FAD
ARB12693 大鼠凝血因子IX(FIX)含量检测 Rat fcoagulation factor Ⅸ,fⅨ ELISA KITRat fcoagulation factor Ⅸ,fⅨ ELISA KIT
PY02-327 5%-8%羊血琼脂基础 250克
1806-34-4 POPOP 1,4-双(5-苯基恶唑)苯(液闪增剂)
9001-51-8 己糖激酶 Hexokinase
动植物组织RNA稳定液现货供应关键词:Tissue Stabilizer,动植物组织RNA稳定液,SY0267
ARB11583 人基质细胞衍生因子1A(SDF-1A/CXCL12)Elisa分析 Human stromal cell derived factor 1a,sdf-1a ELISA KIT
001004 山羊血清 100ml|500ml
ARB10105 人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA检测服务 Human gtpase activating protein,gap ELISA KIT
PY08-029 一次性血液增菌培养基 00ml 10支/盒,用于从血液中分离病原菌
51707-55-2 噻苯隆 Thidiazuron (TDZ)
BL0954 胶体金标记羊抗大鼠IgG抗体
ARB13018 小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)elisa检测操作说明书 Mouse ldl-ic ELISA KIT
D-麦芽糖 Nonivamide 69-79-4
PY01-036 抗坏血酸 AR|BR 25克
ARB12718 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)Elisa定量检测 Rat myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody igg,mpo-anca igG ELISA KIT
茉莉酮酸甲酯 Abietic acid 1211-29-6或39924-52-2
ARB10063 人B细胞活化因子(BAFF)酶标法分析
ARB12063 大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA代测服务 Rat macrophage inflammatory protein 2,mip-2 ELISA KIT
F030235 HRP标记山羊抗鸡IgY IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Chicken IgY(IgG)
BL0915 FITC标记BSA抗体
还原辅酶Ⅰ二钠盐 Lithium bromide dihydrate 606-68-8
ARB11099 人金葡菌肠毒素(SE)尿液中含量检测 Human staphylococcus aureus enterotoxins,se ELISA KIT
ARB13574 兔子白介素2(IL-2)elisa测定使用说明书 Rabbit interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
ARB12684 大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)含量分析 Rat mullerian inhibiting substance/anti-mullerian hormone,mis/amh ELISA KIT
肌氨酸钠 Fast red RC salt 4316-73-8
HC0116 透析袋MD27 ( 截留量1000)
聚乙二醇350单甲醚 Sodium benzoate 9004-74-4
动植物组织RNA稳定液现货供应关键词:Tissue Stabilizer,动植物组织RNA稳定液,SY0267
·10×RIPA裂解液(中)(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)
编号:SY0320
英文名称:10×RIPA Lysis Buffer (Medium),without enzyme inhibitors
规格:100ml
本品属于裂解强度居中的RIPA裂解液,裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。本品为10倍浓缩液,使用时需稀释成1×工作液。
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
注意事项
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
【注】:如需加入PMSF,请在使用前数分钟内加入,使其最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
【注】:如需加入PMSF,请在使用前数分钟内加入,使其最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
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