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3个月
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上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
30T
聚烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE),其原理在于聚烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚烯酰胺凝胶及SDS-聚烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚烯酰胺凝胶蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开,主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。
操作步骤(仅供参考):
1、 配制10%过硫:直接在0.5g Ammonium Persulfate中加入5ml蒸馏水,充分溶解,分装成小份储存于-20℃或4℃。
2、 根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度,按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(下层胶):
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文献和实验相关专题 SDS-PAGE 凝胶制备属于实验室最常规的操作了,刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方,这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。 1. 分离胶(12%) 配制 所需试剂 所需体积 分离胶(12%
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
模板。为防止渗漏,可在上、下电极槽中加入蒸馏水,但不能超过短板,以防凝胶被稀释,约30min,凝胶聚合,继续放置20~30min后,倒去上、下电极槽中的蒸馏水,小心拔出梳形样品槽模板,用窄条滤纸吸去残余水分,注意不要弄破凹形加样槽的底面。倒入电极缓冲液即可进行预电泳或准备加样。(三)样品的处理与加样 1、样品的处理 根据分子量标准蛋白试剂盒的要求加样品溶解液,如上海东风生化试剂厂生产的低分子量标准蛋白试剂盒,每一安瓿则需加入200μL样品溶解液,自己配制标准及未知样品,按0.5~1mg/1ml
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