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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
50ml/10ml
| 规格: | 50ml | 产品价格: | ¥180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10ml | 产品价格: | ¥65.0 |
自备材料:
1、 载玻片
2、 盖玻片
3、 荧光显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞样本
①染色完成后,吸去染色液。
②滴一滴甘常规甘油封片剂于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触封片液,尽量避免气泡。
③在显微镜下观察。
2、组织切片
①染色完成后,吸去染色液。
②滴一滴常规甘油封片剂于组织切片上,盖上盖玻片,让切片接触封片液,尽量避免气泡。
③在显微镜下观察组织切片。
3、其它样品
其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。
注意事项:
荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。
在使用常规甘油封片剂的情况下,虽然可减缓淬灭,仍需尽量避光。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化,不同点如下: 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油:0.01M PBS (1:1)。条件许可,建议购买抗淬灭的封片液,使标本可以保存更久。 5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。 6、荧光抗体染色假阳性可能会多,需要分别设定阳性和阴性
1.细胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗5min;4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理);5.PBS漂洗2次,每次5min;6.1%BSA封闭30min;7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h;8.PBS漂洗2次,每次5min;9.加入1%BSA稀释的二抗,于37℃杂交1h;10.PBS漂洗2次,每次5min;11.5ug/ml DAPI染色2min;12.抗淬灭封片剂封片。抗淬灭封片剂
,每次5min; 9.加入1%BSA稀释的二抗,于37℃杂交1h; 10.PBS漂洗2次,每次5min; 11.5ug/ml DAPI染色2min; 12.抗淬灭封片剂封片。 抗淬灭封片剂: 2.5% DABCO (w/v) 50mM Tris(pH8.0) 90%甘油
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