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- 2025年07月09日
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北京鼎国
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文献和实验系列稀释样本的最高浓度做起。 6.模板降解。避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。 Q2．CT值出现过晚 1.扩增效率低，反应条件不够优化。设计更好的引物或探针；改用三步法进行反应；适当降低退火温度；增加镁离子浓度等。 2.PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。 3.PCR产物太长。一般采用80-150bp的产物长度。 Q3．标准曲线的线性关系不佳 1.加样存在误差，使得标准品不呈梯度。 2.标准
)= 50 mg/ml (2).ss DNA (single stranded DNA)= 40 mg/ml (3).oligonucleotide = 33 mg/ml 4.Ethidium bromide定量法： 利用一系列不同浓度的DNA标准溶液（0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml），或已知浓度的DNA marker，和未知浓度DNA样品一起进行琼胶（洋菜胶）电泳，以EtBr染色后，于UV灯箱上照相，比较标准浓度及未知浓度的亮度，来求取DNA 的含量
3.Spectrophotometer定量法： 测定260nm吸光值，OD=1.0代表值如下： a. ds DNA (double stranded DNA) = 50 mg/ml b. ss DNA (single stranded DNA) = 40 mg/ml c. oligonucleotide = 33 mg/ml 4.Ethidium bromide定量法： 利用一系列不同浓度的DNA标准溶液（0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml），或已知浓度的DNA marker，和未知浓度DNA样品
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