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53
- 英文名:
Protein protectant AEP-HBC
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
蛋白保护剂AEP-HBC
英文名称:Protein protectant AEP-HBC
级别:BR
蛋白含量:>99.0%
建议使用量:0.8~3.5%
比旋光度:+128~+145º
MS:5~6
水分:<3.5%
氯化物:≤0.02%
重金属(as Pb):≤0.0005%
pH (H2O, 20℃):5.0~8.0
性状(以下信息仅供参考):白色或淡黄色粉末
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)酶保护剂,抗沉淀、增溶、促效,适合酶及蛋白液体体系;建议用HPD代替效果更佳
保存:RT
蛋白保护剂AEP-HBC试剂间的干扰原因:
试剂中含有下一测试所要测定的底物,或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而直接干扰下一反应的测定结果;
该试剂所引导的反应对下一项目的反应进程带来了间接的干扰,因为在有试剂污染的情况下,下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。下面通过对试剂成分的分析和相应试验来找出试剂交叉污染可能带来的情况,进而指导相应的项目调整和结果分析
蛋白保护剂AEP-HBC试剂间可能发生的干扰情况
1.ALT(IFCC)、AST(IFCC)试剂中含有高活力LD成分,有可能会对LD的测定带来干扰;
2.ALP(IFCC)、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)、CO2(PEPC)、α-Amy(EPS)等试剂中使用缓冲液,可能会对其后的Mg2+ 测定带来干扰;
3.ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等试剂使用缓冲液,可能会对无机磷的测定带来干扰;
4.CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)试剂中含有Glu成分,其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反应过程,因此可能对Glu测定带来干扰,尤其对Glu的HK法测定可能带来严重干扰;
5.Mg2+试剂 (Calmagite)中含有EGTA成分,为Ca2+络合剂,可能对Ca2+的测定带来干扰;
6.个别试剂以甘油做酶的保护剂,因此可能对TG的测定带来干扰,等等;
7.低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇的试剂成分中都含有CE、CHOD、POD酶,都会与血清成分反应,生成的中间反应产物是H2O2浓度,因为低密度脂蛋白和甘油三酯检测单位都是mmol/L级,而尿酸检测单位是μmol/L级,二者之间相差1 000倍,故检测尿酸的反应杯中只要残留极少量的低密度脂蛋白和胆固醇试剂就可产生大量的H2O2,直接导致尿酸的检测结果的升高;
8.葡萄糖对尿酸试剂的干扰GLU(OX)与UA测定原理均采用Trider's反应方法,试剂探针残留携带的GLU带入到UA反应体系,发生血糖反应其产物红色醌亚胺与UA产物红色醌亚胺颜色叠加,而血清中正常血糖含量远高于尿酸水平,从而导致UA结果严重偏高;
9.胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL) 会对总胆汁酸检测的影响,导致胆汁酸测定值增加。这些试剂中为了保证反应充分,往往含有胆酸钠成分或是一些脂类水解促进剂等,这些物质导致了样本胆汁酸测定的携带性增高及内源产物等副反应性增高;
10.谷丙中的含有的酮戊二酸NADH反应体系会干扰总胆汁酸检测中的Thio-NAD-Thio-NADH循环指示体系,导致测定值偏低;
由于各个试剂公司所提供的产品说明书常不能全面反映试剂的组成情况,所以通过实验发现试剂交叉污染可能带来的干扰变得很重要。下面以两个试验来加以说明:
A.将试剂作为样本进行全套项目测定,根据结果确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目。
B.将一份样本分为两份,一份加生理盐水或其他适当的稀释液,另一份加等量的试剂,同时测定、考察结果的变化,进而确定可能发生试剂交叉污染时造成干扰的项目。进行这一实验时,使用半自动生化分析仪可能会得到更为理想的结果,尤其是针对双试剂反应时, R1、R2加入时机可以得到更为精确的控制。
此外,由于试剂成分的复杂多样性,实时仪器状况的独特性,可能发生的试剂间的交叉污染的情况不尽相同。
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文献和实验或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。 大部分ELISA 检测以血清标本为主。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以 HRP 为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。 血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP,也会
的冻干重组蛋白,已经从包涵体中提纯,添加了蛋白保护剂,使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可,复溶冻干蛋白100 μg,用86 μl的超纯水,轻轻摇晃使蛋白溶解,再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解,一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。 (2)真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译,还要进行翻译后的加工,使得蛋白质的空间折叠方式维持正常,所以重组蛋白必须在真核细胞中进行,如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子,对翻译后的蛋白质进行加工,这样表达的蛋白质具有
Bio 的重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式,原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态,真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存,这样使得重组蛋白非常稳定,在 - 80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解,其中溶解的方法非常关键,因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意,这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。(1)原核细胞表达的重组蛋白。Cambridge Bio 大肠杆菌表达的冻干重组蛋白,已经从包涵体中提纯,添加了蛋白保护剂,使用过滤后的无菌水作为复
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