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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
保存温度-20℃
- 保质期:
按说明保存,有效期1-2年
- 英文名:
VL9, RT, (346 - 354)
- 库存:
一定量库存
- 供应商:
加拿大PLLABS公司
- 规格:
1mg、5mg、25mg
| 多肽名称: | VL9, RT, (346 - 354) |
|---|---|
| 货号: | P2002041 |
| 序列: | Val-Ile-Tyr-Gln-Tyr-Met-Asp-Asp-Leu |
| 分子式: | C53H78N10O17S |
| 形态: | Each vial contains 1-5 mg of lyophilized solid packaged under an inert gas and supplied as a trifluoroacetate salt. |
| 纯度: | Purity > 95% by HPLC |
| 溶解方法: | Distilled water for a solution up to 2 mg/ml, otherwise we recommend using acetonitrile. |
| 保存方法: | Store at -20°C. The product is hygroscopic and must be protected from light. Product is guaranteed one year from the date of shipment. Following reconstitution, aliquot and store at -20°C. |
华拓生物是国际一流的合成多肽企业,拥有600平方米的多肽研发中心,中心设备值达到500万,销售中的常规多肽产品多达3000余种,其中多种化妆品肽、药物肽已经实现产业化(批量生产),并为国内广大科研客户提供多肽合成服务。华拓多肽不仅在国内占有较大份额的市场并远销售欧美地区。华拓生物一贯的承诺100%保证多肽质量,如不符合客户的要求,100%承担全部责任。
深圳市华拓生物科技有限公司(www.otwobiotech.com)
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文献和实验嵌合基因的构建(RT-PCR方法扩增VL、VH基因) 【材料和试剂】 (1) 分泌McAb的杂交瘤细胞(如分泌抗转铁蛋白受体的杂交瘤细胞株)。 (2) 细胞培养常用试剂、培养液、器皿。 (3) 总RNA提取试剂 Trizol Reagenz。 (4) cDNA合成试剂盒。 (5) DNA提取试剂及分子生物学技术所需其他试剂和溶液。 (6) 核酸修饰酶类:T4 DNA连接酶、TaqDNA聚合
肺腺癌单链抗体构建完成。随后分别转化不同的表达菌株进行附着型或外分泌型表达研究。 在构建单链抗体时,亦可设计一组通用引物,可用于扩增小鼠大多单克隆抗体的V区基因。在VH3’(或VL3’)端和VL5’(VH5’)端的引物中合成含有连接序列(linker),采用RT-PCR的方法先分别扩增VH和VL基因,再进行重叠延伸PCR扩增含VH-linker-VL或VL-linker-VH基因,然后克隆到原核表达载体中进行表达。 常用的PCR引物序列如下(供参考): 1) VH
的TG1菌落,最后随机挑选出190个菌落经间接ELISA检测抗内毒素ScFv。 实验结果表明:经RT-PCR扩增出的VH长约340bp,VL约320bp,交联形成的ScFv约800bp。转化入TG1后有约1.9×107个菌落。淘筛一轮过后即有3×104阳性菌落长出,随机挑选190个菌落经ELISA检测有2个阳性克隆 。本研究所采用的PCR引物是根据小鼠抗体可变区FR1和FR4的保守碱基序列设计的,实验证明可以很好地扩出整套抗体可变区基因。而且,选用的SfiⅠ、NotⅠ限制性内切酶借助
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