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培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
用于微生物分离,鉴定,计数。如图,微生物分离成菌落、菌苔。图中为大肠杆菌菌落,是用涂布平板法得到。
用于分离微生物的固体培养基
用于分离微生物的固体培养基
(2)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
用于观察微生物运动特征。如图,左侧试管中微生物不运动,而右侧试管中微生物运动,因而两试管中现象不同
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
(3)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。
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胰蛋白酶溶液培养按培养基组成物质的化学成分区分
根据对培养组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
(1)天然培养基。天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。例如培养细菌常用的肉汤蛋白胨培养基:牛肉膏3g,蛋白胨5g,水1000mL。
用做这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源广泛,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基和大生产上的培养基。
这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响,另外自养微生物一般不能在其上面生长。
(2)合成培养基。合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。例如培养细菌的葡萄糖铵盐培养基:C6H12O60.2%,K2HPO40.7%,KH2PO4 0.3%,Na3C6H5O70.05%,MgSO4·7H2O0.01%,(NH4)2SO40.1%,H2O 100mL。
这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。
(3)半合成培养基。在合成培养基中,加入某种或几种天然成分;或者在天然培养基中,加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。如果在合成培养基中加入琼脂,由于琼脂中含有较多的化学成分不太清楚的杂质,故也只能算是半合成培养基。这种培养基在生产实践和实验室中使用最多。
Cary-BlairTransportMedium
Pseudomonas agar F base 假单胞菌琼脂F基础 1.10989.0500 MERCK默克 incubation media Pseudomonas agar F base 假单胞菌琼脂F基础 1.10989.0500 MERCK默克
哥伦比亚琼脂培养基 250g 灭菌后冷至45℃左右时加入5%脱纤维羊血,用于空肠弯曲菌的培养。(CP、GB、EP、USP)
脂肪间质干细胞无血清培养基Adultmesenchymalstemcellculturemediumwithoutserum
Power-nitratemedium
麦芽汁培养基250g用于霉菌和酵母菌增菌培养
乳糖肉汤(LB) 250(g) incubation media 乳糖肉汤(LB) 250(g)
葡萄糖铵发酵管 葡萄糖铵发酵管 20支 BR
SCDLP液体培养基250用于化妆品样品制备,前增菌培养(GB标准)incubationmediaSCDLP液体培养基250用于化妆品样品制备,前增菌培养(GB标准)
CCDASupplement
琼脂培养基O250g用于金黄色葡萄球菌的分离培养。
BAIRD-PARKER agar Staphylococcus selective agar base acc.to 1.05406.0500 MERCK默克 incubation media BAIRD-PARKER agar Staphylococcus selective agar base acc.to 1.05406.0500 MERCK默克
绿脓菌素测定用培养基(PDP) 250g 用于鉴别绿脓杆菌产生绿脓菌素试验(GB15979-2002
大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J
长白山猪胚胎皮肤成纤维样细胞;201184
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
BHK细胞,幼仓鼠肾细胞 人胰腺癌细胞,CFPAC-1细胞 CM-R093大鼠胎儿真皮成纤维细胞完全培养基100mL
人骨骼肌成肌细胞HSkMM
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照)
人气管平滑肌细胞HTSMC
ANGPT2 Others Mouse 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人细胞裂解液 (阳性对照)
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
黄胸鼠肺成纤维细胞;YCR 高转移肺癌细胞,95-D细胞 STO细胞,鼠胚成纤维细胞系
PC-12(高分化),PC12,大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化) Rattus
EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人细胞裂解液 (阳性对照)
胰蛋白酶溶液培养大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J
长白山猪胚胎皮肤成纤维样细胞;201184
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
BHK细胞,幼仓鼠肾细胞 人胰腺癌细胞,CFPAC-1细胞 CM-R093大鼠胎儿真皮成纤维细胞完全培养基100mL
人骨骼肌成肌细胞HSkMM
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照)
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文献和实验实验19 植物的无素缺乏症(溶液培养) 原理 植物的生长发育,除需要充足的阳光和水分外,还需要矿质元素,否则植物就不能很好地生长发育甚至死亡。应用溶液培养技术,可以观察矿质元素对植物生活的必需性;用溶液培养做植物的营养试验,可以避免土壤里的各种复杂因素。近年来也已应用溶液培养进行无污染蔬菜的栽培生产。 仪器药器 分析天平 培养缸(瓷质或塑料
一、胰蛋白酶(trypsin)溶液 胰蛋白酶是白色或淡黄色粉末,低温干燥保存。主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞离散。其活性以其消化酪蛋白的能力进行测定。常用1:250(1:500)方法表示,即1份胰蛋白酶可以消化250份(或500份)酪蛋白。 胰蛋白酶对细胞的分离作用与细胞的类型和细胞的性质关系密切。不同
对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为8.0、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用 。 1.称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为0.25%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水
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