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6×1 L
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文献和实验Crystallization of Kinesin Family Motor Proteins
/v) PEG 4000, 0.3% octyl-ß-D-glucoside, 2 mM ATP, 10 mM MgCl2Reservoir: 15% (w/v) PEG 4000, 60 mM NaCl equally bufferedSablin & Fletterick, 1995Sablin et al., 1996Ncd 293-700Hanging drop 18°C17 mg/ml protein in 20 mM HEPES pH 7.4, 200 mM NaCl, 10 mM
Preparation of Nuclear Extracts for Gel Shifts and Westerns Blots
into prechilled 0.5 ml prelabeled microcentrifuge tubes, freeze in liquid nitrogen, and store in �80 C freezer. Buffer A: 10 mM HEPES, pH 7.9 10 mM KCl 0.1 mM EDTA Add just before use: 1mM DTT, 0.5 mM
7.4左右的离子缓冲液,接近生理浓度下的NaCl,一定比例的去垢剂和甘油以及各类蛋白酶抑制剂等)来说明其各主要成份的用途,进而帮助我们如何针对不同的实验目的和不同的蛋白质特性来选择最佳的裂解液。 1. 缓冲液:离子缓冲液常采用pH7.4的Hepes或者Tris-Cl。 2. NaCl浓度一般习惯用150 mM,这主要是因为150 mM 接近生理浓度,不会破坏蛋白质之间的相互作用。然而细胞内部的NaCl浓度并不是均一的,局部NaCl的浓度可以低到50 mM,150 mM 的NaCl有可能会破坏
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