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- 英文名:
Laminin
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999
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北京拜尔迪生物技术有限公司
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10.5mg
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文献和实验或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
的作用是调控基因表达。例如组蛋白甲基化多导致基因沉默,去甲基化则相反;乙酰化一般是转录激活,去乙酰化则相反。当然,也可在此基础上产生复杂的生物学效应。例如组蛋白去乙酰化酶 HDAC 可影响免疫系统;H3K4me3、H3K9me2 能够调控记忆的形成, 而且 H3K 甲基化与 X 染色体失活、基因组印记和异染色质形成有关;H3 乙酰化通过多种机制调控以来 ATP 的染色质重塑 ,并参与炎症反应;H2A、H2B 泛素化则与 DNA 损害反应有关;而 H3S28 磷酸化与 H3K27 乙酰化可激活转录
两者之间,选择室温孵育有助于实验流程的便利,同时也适用于较多样本的检测。二抗一般室温孵育 30 min。 切片清洗(浸洗、冲洗和漂洗) 为了防止一抗、二抗等残留而引起非特异性染色,适当地加强清洗尤其重要,建议使用洗瓶冲洗 30 s X 3 次,而一抗孵育后可用 TBST 单独清洗。清洗中要注意单独冲洗,防止交叉反应造成污染,同时温和冲洗,防止脱片。TBS 的 pH 和离子浓度建议用为 7.6-8.0,浓度是 0.01 M。中性及弱碱性条件有利于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低
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