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- 供应商:
上海莼试
- 库存:
大量
- 靶点:
EPB41L5
- 克隆性:
多克隆
- 抗体英文名:
Anti-EPB41L5
- 抗体名:
红细胞膜蛋白条带EPB41L5抗体
- 标记物:
HRP等
- 宿主:
鼠,牛,马,兔,羊等
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat等
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体或固体
- 应用范围:
WB IHC-P IHC-F IF
- 浓度:
10mg/ml
- 保存条件:
密封保存
- 规格:
100ul
中文名:红细胞膜蛋白条带EPB41L5抗体
英文名:Anti-EPB41L5
库存:上海现货供应
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用途:仅供科研实验!
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单抗原理:
抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
单抗制备过程:
1.提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞(不能在体外生长)。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养,选出所需要的细胞群,并进行克隆化培养,得到稳定的杂交瘤细胞,再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯,一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。
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文献和实验,但也有极少数情况下复合物的形成正好会覆盖抗体识别位点,这时只需改用另一种抗体即可。 有两点需要注意:1. 样品的一般处理过程往往会破坏蛋白的相互作用,一些生理状态下以复合体存在的蛋白往往会分离而成为游离状态;2. 以复合体形式存在的目的蛋白条带往往出现在较高分子量区。 zhuhuachao 谢谢了,受教了。特别是2个注意点。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微
封闭及杂交 在做杂交时,个人建议:还是使用杂交袋进行一抗和二抗的孵育,这样节约抗体。 操作开始: 1. 将膜用 TTBS 从下向上浸湿后,移至含有封闭液的平皿中,室温下脱色摇床上摇动封闭 1 h。必要时可先用丽春红染色(2%乙酸,0.5%丽春红的水溶液)观察蛋白条带,再用去离子水和 TTBS 将丽春红洗脱后封闭,如用蛋白 marker 则可省略此步。 2. 将一抗用 PBST 稀释至适当浓度(在 1.5 ml 离心管中);撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验
的此蛋白条带一般在什么位置,是否有不同的varient type。或者从sigma等一些知名厂家网站上搜索针对此蛋白的抗体,关注下他们抗体说明书中的简介及Western blot配图说明,以防你购买抗体说明的印刷失误之类的。 2、如果比照无误,接下来,查看你电泳条件。是否是变性电泳(loading buffer里含有SDS),因为非变性电泳时蛋白可能会结合配体或受体等其他分子。购买的loading buffer是否质量过关,或者自己配制的话,成分和PH值是否正确。此外,添加
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