嘌呤霉素试剂

特别提示：包括嘌呤霉素在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：嘌呤霉素
英文名称：Puromycin
ＣＡＳ＃：58-58-2

产品货号：嘌呤霉素
产品规格：25mg|100mg

本品是蛋白质合成抑制剂。抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
储存条件：-20℃
纯度：≥98%(TLC)
性状：白色或白中带有黄色的粉末
别名：二盐酸嘌呤霉素;嘌呤霉素盐酸盐
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC)，赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。

嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。

使用方法：

1.建议使用浓度
哺乳动物细胞：1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定;
大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。

2.溶解方法
用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，经0.22 μm滤膜过滤除菌后分装于-20℃冻存;也可溶于甲*，配制成10 mg/ml的储存液。

3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)
嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线(kill curve)。
1)Day 1：24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜;
2)Day 2：
a)准备筛选培养基：含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15μg/mL，至少5个梯度);
b)往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基;之后37℃孵育细胞;
3)Day 4：更换新鲜的筛选培养基，并观察细胞存活率。
4)根据细胞的生长状态，约2-3天更换新鲜的筛选培养基;
5)每日监测细胞，观察存活细胞率，从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物最低浓度。

4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选
等转染含有pac基因的质粒后，细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖，以筛选出稳定转染子。
1)细胞转染48h后，将细胞(原样或稀释)置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。
注意：当细胞处于分裂活跃期时，抗生素作用最明显。细胞过于密集，抗生素产生的效力会明显下降。最好进行细胞分盘使其密度不超过25%。
2)每隔2-3天，移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。
3)筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间，这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。注意：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
4)转移和放置5-10个抗性克隆到一个35mm的培养皿中，用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。

注意事项：
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。

除了嘌呤霉素试剂,二盐酸嘌呤霉素,嘌呤霉素盐酸盐，我公司还供应以下相关产品：



名称：氯霉素溶液(34mg/ml)
货号：RFT176
规格：5×1ml
氯霉素源自委内瑞拉链霉菌，是一种光谱抗生素，常用于分子生物学中的细菌筛选。氯霉素对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗性。

CAS号：56-75-7
分子量：323.13
使用方法：根据实验具体要求操作，一般Chl在培养基中终浓度为25～170μg/ml。

储存条件：-20℃，有效期12个月

名称：卡那霉素硫酸盐溶液
货号：RFT179
规格：5×1ml
卡那霉素是一种从Streptomyces kanamyceticus中分离出来的氨基糖酐类抗生素。在分子生物学中，卡那霉素常被作为一种蛋白质合成的抑制剂，用于筛选具有卡那霉素抗性基因的克隆。临床上，卡那霉素用于治疗多种细菌的感染，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、结核杆菌等。卡那霉素硫酸盐溶液(Kanamycine H2SO4 Solution(10mg/ml)由卡那霉素硫酸盐溶于水组成，经0.22μm过滤除菌，可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为10～50μg/ml，其中严紧型质粒常采用10 μg/ml，松弛型质粒常采用50μg/ml。

使用方法：
根据实验具体要求操作，一般卡那霉素在LB中终浓度为10～50μg/ml。可以大体按照1/1000 LB体积加入10mg/ml Kanamycin溶液，如100ml LB中加入100μl 卡那霉素硫酸盐溶液。

注意事项：
1、尽注意无菌操作，避免污染。
2、避免反复冻融。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃避光，有效期6个月。

名称：盐酸克林霉素
货号：QN0038
规格：5g
本品广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面。本品属林可霉素类抗生素。为林可霉素的衍生物，抗菌谱与林可霉素相同，抗菌活性较林可霉素强4～8倍。对革兰阳性菌如葡萄球菌属(包括耐青霉素株)、链球菌属、白喉杆菌、炭疽杆菌等有较高抗菌活性。对革兰阴性厌氧菌也有良好抗菌活性，拟杆菌属包括脆弱拟杆菌、梭杆菌属、消化球菌、消化链球菌、产气荚膜杆菌等大多对本品高度敏感。革兰阴性需氧菌包括流感嗜血杆菌、奈瑟菌属及支原体属均对本品耐药。本品与青霉素、氯霉素、头孢菌素类和四环素类之间无交叉耐药，与大环内酯类有部分交叉耐药，与林可霉素有完全交叉耐药性。

CAS：21462-39-5
分子式：C18H33ClN2O5S.HCl
分子量：461.44
储存条件：室温，避光防潮密闭干燥
纯度：＞800μg/mg
性状：白色结晶性粉末

本品的作用机制是与细菌核糖体50S亚基结合，阻止肽链的延长，从而抑制细菌细胞的蛋白质合成。本品系抑菌药，但在高浓度时，对某些细菌也具有杀菌作用(仅供参考)。

名称：头孢唑啉钠
货号：QN0057
规格：5g
CAS：27164-46-1
分子式：C14H13N8NaO4S3
分子量：476.49
储存条件：2～8℃
别名：唑啉头孢菌素钠

名称：博莱霉素
货号：QN0065
规格：1.25ml|8×1.25ml
本品Zeocin是一种属于争光霉素家族的糖蛋白抗生素， 在体内能作用于大多数细菌(包括E. coli)、真菌(如：酵母菌)、植物细、动物细胞。

CAS：9041-93-4
分子式：C55H83N19O21S2Cu
分子量：1137.41
储存条件：-20℃避光
纯度：100 mg/mL
性状：淡绿色液体
浓度：100 mg/mL

Zeocin试剂是博来霉素抗生素家族的一个成员。 其抗性由编码一种 13,665 道尔顿蛋白质的 Sh ble 基因赋予。 在表达这种蛋白质的细胞中，Zeocin无法结合和切割细胞 DNA。 Zeocin对大多数好氧细胞有效，可用于选择哺乳动物和昆虫细胞系、酵母以及细菌。 选择细胞时，Zeocin的用量为 50-2000 ug/ml(通常 300 ug/ml)，具体取决于细胞类型。

名称：盐酸壮观霉素
货号：QN0071
规格：1g
CAS：22189-32-8
分子式：C14H24N2O7·2HCl·5H2O
分子量：495.35
储存条件：2～8℃
性状：白色或类白色粉末

名称：青霉素G钾盐
货号：QN0079
规格：1MU
本品常用于抑制细菌细胞壁的合成。

CAS：113-98-4
分子式：C16H17KN2O4S
分子量：372.48
储存条件：室温干燥保存
性状：白色结晶性粉末
效价：1440-1680units/mg
溶解性：溶于水，100mg/ml。
抗菌谱：革兰氏阳性菌。

名称：莫能霉素钠
货号：QN0083
规格：1g
本品常用作Na+离子载体，阻断糖蛋白分泌，可能诱导嗜铬细胞儿茶酚胺的分泌，用于碱金属离子复合物的电位和光谱学研究。

CAS：22373-78-0
分子式：C36H61NaO11
分子量：692.86
储存条件：2～8℃
纯度：90%
别名：莫能菌素钠盐

Monensin中文名莫能霉素，一种天然离子载体(ionophore)，可选择性结合单价阳离子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+，并把这些阳离子转运到细胞膜内，通过影响pH值或Na+-K+平衡来促使革兰氏阴性菌死亡(如Micrococcus, Bacillus, 和 Staphylococcus)，减缓P. falciparum和Coccicdium protozoa的增殖，以及抑制一些病毒的复制等。此外，monensin还可破坏高尔基体，抑制细胞内的蛋白转运，因此，常用作蛋白转运抑制剂，用于抑制细胞因子等分泌型蛋白的分泌，或免疫染色时通过抑制分泌来增强分泌型蛋白的染色。

莫能霉素为钠盐形式，分别以粉末(Cat#50501ES60)和溶液(Cat#50501ES03, Cat#50501ES08)供货。莫能霉素粉末，可用有机溶剂如乙醇(25mg/ml)、DMSO(25mg/ml)配制成储存液。溶液形式的莫能霉素为溶于乙醇的1000×浓缩液(浓度为2mM)。莫能霉素微溶于水，为了增强其水溶性，可将其储存液稀释于缓冲液或等渗盐溶液。但如后续进行生物学实验，需确保其有机试剂残留量降低到不影响实验的限度，因为有机溶剂在即使很低的浓度也会影响生理学效应。建议莫能霉素水溶液现配现用，存放不超过1天。

莫能霉素常见使用浓度范围为1-5μM。用于增强分泌蛋白的免疫染色的常用使用浓度为2μM，预处理1小时左右即可。具体浓度依实验应用而定。

名称：青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液(100×三抗)
货号：GL0018
规格：100ml
用途：
细胞培养抗生素

注意事项：
无菌溶液。主要由青霉素、链霉素、两性霉素等组成，经过滤除菌。

储存条件：-20℃，12个月

名称：盐酸土霉素溶液(50mg/ml)
货号：GL0026
规格：10ml
用途：
抗生素

注意事项：
经无菌处理。

储存条件：-20℃，避光，12个月

名称：盐酸万古霉素溶液(10mg/ml)
货号：GL0027
规格：10ml
用途：
抑制细菌细胞壁的合成，抑制肽聚糖的生物合成，对葡萄球菌、难辨梭状芽胞杆菌敏感。

注意事项：
经无菌处理。

储存条件：-20℃，避光，12个月

名称：秋水仙碱溶液(10mg/ml)
货号：GL0032
规格：5ml
用途：
又称秋水仙素，细胞分裂阻断剂，有丝分裂阻断剂

注意事项：
工作浓度为1-10umol/L

储存条件：4℃，避光，6个月