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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1-2W
- 英文名:
Restore™ PLUS加强型抗体剥离液
- 规格:
500ml
Restore™ PLUS加强型抗体剥离液
描述
Thermo Scientific Restore PLUS Western Blot抗体剥离缓冲液是用于去除膜上结合的一抗和二抗的增强型配方,方便用户使用化学发光底物再次检测膜。Restore PLUS Western Blot抗体剥离缓冲液的特点:
• 即用型,操作简单—无需稀释;无令人不快的气味;室温储存
• 兼容性—可在湿润或干燥的硝化纤维素膜和PVDF膜上使用;可与任何封闭缓冲液、酶偶联物和化学发光底物配合使用
• 高性价比—节省宝贵的时间和样本;首次使用可有效剥离
• 强大而温和—有效保留转印蛋白,对印迹可进行五次抗体剥离操作
• 灵活—用于剥离和重新检测抗体以优化抗体浓度,或使用不同抗体检测新的抗原
Retore PLUS抗体剥离缓冲液是Thermo Scientific Restore Western Blot抗体剥离缓冲液经典版本的替代配方。Retore PLUS抗体剥离缓冲液配方温和,专为免疫印迹实验中难以去除、需要更长孵育时间或孵育温度在22°C以上的抗体而设计。本产品可在室温条件下快速高效地去除高亲和力抗体,而不会对转印蛋白造成影响,从而实现靶标蛋白的多次检测。
实验方案概要:
•漂洗印迹以去除化学发光底物。
•室温条件下,在Restore Western Blot抗体剥离缓冲液中孵育印迹5至15分钟
(或在37°C条件下孵育高亲和力抗体)
•取出印迹膜并在洗涤缓冲液中进行清洗
•封闭印迹膜
•测试抗体是否已充分移除。
•进行下一次免疫印迹实验。
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文献和实验Antibody Dilution Buffers Primary Antibody Dilution Buffer: 1%BSA (stabilizer and blocking) 0.1% cold fish skin gelatin (blocking)
那么如何通过改变抗体稀释液的配方,寻求抗体孵育的最佳条件呢?首先要认清,抗体稀释液没有一个绝对通用的配方;一种抗体一个脾气。其次,抗体稀释液的配方要兼顾与特异性抗体竞争抗原的强度,以及对其他区域的封闭强度两方面的平衡。目前,抗体稀释液中可以充当封闭蛋白的主要有milk,BSA和gelatin,似乎很少的样子 。。。可是,你有没有考虑过“复方”?--这下配方无限多了吧。1. 采用milk,BSA和gelatin的单方。3% milk,5% BSA,2.很多情况下单方的浓度很高了,背景问题仍不能
◆ Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体). 4. 预电泳和电泳: 0.25X TBE在冰上120V 预电泳1小时; 务必换掉预电泳的缓冲液, 用新的0.25X TB低温下150V,电泳约60分钟。 注意横压电泳的时候注意电流的数字变化,记录开始电泳和电泳结束的电流数据的变化! 5. 电转运 在0.5X TBE中390mA电转移40分钟, 注意转运膜的选择, 有一种离子加强型的转运效果比较
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