逆转录试剂盒,高效率cDNA合成试剂盒

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  • FSK-101
  • 2025年07月14日
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      ReverTra Ace -α-®

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      100次

    逆转录试剂盒,高效率cDNA合成试剂盒

    用途


    RT-PCRcDNA合成

    说明


    本试剂盒使用的逆转录酶ReverTra Ace®属于在高温反应性和反应效率方面进行了提高的改良型M-MLV RTase(RNaseH-),与以往的RTase相比,可以合成更长的cDNA(已确认到可以合成cDNA长度最长可达14kb)。
    逆转录试剂盒,高效率cDNA合成试剂盒

    特征


    ●高效率
    使用高效率逆转录酶「ReverTra Ace®」,可以高效率地合成cDNA。
    ●应用范围广
    可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以及Specific Primer的各种逆转录情况。
    ●确证
    因含有阳性对照(positive control), 可在确证各步骤的同时推进实验进展。

    实验例

    使用ReverTra Ace -α-®以HeLa Total RNA(1μg)为模板,进行cDNA的合成后,使用各种PCR酶,以β-actin(838bp)为目的片段进行PCR反应。cDNA合成反应是在20μl的反应体系中,42℃下反应20min.,接着99℃进行5min的失活处理。然后,向合成的cDNA反应液中加入80μl的PCR溶液,使总体系达100μl,进行PCR反应。
    结果显示,所有的酶都确认有扩增,ReverTra Ace -α-®的逆转录产物可适用于各种PCR酶的扩增反应。
    逆转录试剂盒,高效率cDNA合成试剂盒




    参考文献

    1)Hatta M. et al., Intl. J. Mol. Med., 9: 147-152 (2002)
    几点建议

    ● PCR反应液的添加量

    以Taq为基础的PCR酶以及KOD Dash的反应中最多可添加20%,KOD -Plus- 系列及KOD FX 系列的反应中最多可添加4%,推荐最好使用2%以下的逆转录反应液。

    ●模板RNA

    Total RNA、mRNA、tRNA、rRNA等各种RNA都可以使用。各种情况下使用高纯度的样品时,可以得到较好的结果。

    ●对照体系

    样品在第一次进行RT-PCR时,推荐同时进行对照实验。本试剂盒的对照用G3PDH引物,可适用于human、mouse、rat及swine的对照使用,PCR产物长度0.45kb。

    FAQ请点击这里。

    产品内容

    ReverTra Ace®100μl
    5×RT Buffer*〔TRT-1B〕400μl
    Random Primer〔FSK-301〕100μl
    Oligo(dT)20 Primer 〔FSK-201〕100μl
    10mM dNTPs〔NTP-301〕200μl
    RNase Inhibitor100μl
    RNase Free H2O1.2ml


    *5×RT Buffer与ReverTra® Ace用的Buffer组分相同。

    基本反应条件

    〈cDNA合成〉
    灭菌蒸馏水Xμl
    模板RNA
    100-1000ng total RNA
    10-100ng mRNA
    Primer
    1μl Oligo(dT)20 Primer
    1μl Random Primer
    10pmoles* Specific Primer
    5×RT Buffer4μl
    10mM dNTPs2μl
    ReverTra Ace®1μl
    RNase Inhibitor1μl

    Total Volume20μl

    几点建议

    ● PCR反应液的添加量

    以Taq为基础的PCR酶以及KOD Dash的反应中最多可添加20%,KOD -Plus- 系列及KOD FX 系列的反应中最多可添加4%,推荐最好使用2%以下的逆转录反应液。

    ●模板RNA

    Total RNA、mRNA、tRNA、rRNA等各种RNA都可以使用。各种情况下使用高纯度的样品时,可以得到较好的结果。

    ●对照体系

    样品在第一次进行RT-PCR时,推荐同时进行对照实验。本试剂盒的对照用G3PDH引物,可适用于human、mouse、rat及swine的对照使用,PCR产物长度0.45kb。

    FAQ请点击这里。

    产品内容

    ReverTra Ace®100μl
    5×RT Buffer*〔TRT-1B〕400μl
    Random Primer〔FSK-301〕100μl
    Oligo(dT)20 Primer 〔FSK-201〕100μl
    10mM dNTPs〔NTP-301〕200μl
    RNase Inhibitor100μl
    RNase Free H2O1.2ml


    *5×RT Buffer与ReverTra® Ace用的Buffer组分相同。

    基本反应条件

    〈cDNA合成〉
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    模板RNA
    100-1000ng total RNA
    10-100ng mRNA
    Primer
    1μl Oligo(dT)20 Primer
    1μl Random Primer
    10pmoles* Specific Primer
    5×RT Buffer4μl
    10mM dNTPs2μl
    ReverTra Ace®1μl
    RNase Inhibitor1μl

    Total Volume20μl

    几点建议

    ● PCR反应液的添加量

    以Taq为基础的PCR酶以及KOD Dash的反应中最多可添加20%,KOD -Plus- 系列及KOD FX 系列的反应中最多可添加4%,推荐最好使用2%以下的逆转录反应液。

    ●模板RNA

    Total RNA、mRNA、tRNA、rRNA等各种RNA都可以使用。各种情况下使用高纯度的样品时,可以得到较好的结果。

    ●对照体系

    样品在第一次进行RT-PCR时,推荐同时进行对照实验。本试剂盒的对照用G3PDH引物,可适用于human、mouse、rat及swine的对照使用,PCR产物长度0.45kb。

    FAQ请点击这里。

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