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- 库存:
大量
- 英文名:
ER2738 Competent Cell
- 保质期:
三年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
10×100ul / 20×100ul
| 产品编码 | 产品名称 | 保存条件 | 单位 |
| YB80DX01 | ER2738感受态细胞 | -70℃, 六个月 | 1pcs |
感受态细胞名称: ER2738, ER2738感受态细胞, ER2738菌株
菌株类型: E.coli
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃, 有氧
基因型:
F´proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10(TetR)/ fhuA2 glnV Δ(lac-proAB) thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
抗性: 四环素
质粒转化条件: 电转化
应用: 噬菌体展示蛋白表达,可以用于M13噬菌体工作,普通的质粒克隆,能够利用蓝白斑筛选,也可以用于蛋白表达。
菌株特点:
ER2738感受态细胞具有四环素抗性,主要用于噬菌体展示的研究工作。
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文献和实验的试管中,挑选新鲜的大肠杆菌ER2738单菌落,37℃、230r/min振荡培养过夜,将2m1ER2738培养液转入20m1 LB溶液中继续培养50min,然后37℃、100r/min振荡培养15min,即成为感受态细胞。加入噬菌体后,继续37℃、100r/min培养10min,再转到37℃、230r/min的条件下继续培养4.5h,培养物于4℃、8 000r/min离心15min,取上清液加入1/6体积的PEG―NaCl于4℃沉淀过夜。将溶液于4℃、10 000 r/min离心20min,弃
噬菌体: M13KE T7宿主细胞 : ER2738 BL21/BLT5403/BLT5615噬菌体释放方式: M13噬菌体溶源性,不裂解宿主菌。极大地简化了每轮淘选过程中的噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法即可。 T7是裂解性的,其展示的蛋白不需分泌。这一优点使更多的序列可能被展示。 但不利于提纯。融合方式:M13噬菌体N端与pIII蛋白融合,不适合克隆cDNA,因为cDNA中为oligo d(T))常位于翻译终止密码子的下游。T7噬菌体C端与T7基因10 衣壳
pfu指的是噬菌体的空斑形成单位。以下是关于测定M13效价的一个方法:测定噬菌体滴度只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时(即细胞过量时),噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此,建议检测噬菌体贮液的滴度时,在感染前进行稀释,而不是在高MOI值的情况下稀释被感染的细胞。低MOI值有助于确保每个噬菌斑仅含一个DNA序列。1. 接种ER2738单菌落于5-10 ml LB培养基中,摇床培养至对数中期(OD
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