- ¥180 - 1850
- YBscience
- YB15210
- 进口/国产
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
XL2-Blue Chemically Competent Cell
- 保质期：
三年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10×100ul / 20×100ul
| 编码 | 品名 | 规格 | 保存条件 |
YB15210 |
XL2-Blue感受态细胞 | 10×100μl | -80℃ |
| pUC19（control vector） | 10pg/μl,10μl |
基因型
TetRΔ(mcrA)183 Hte[F′{proAB lacIq lacZΔM15 Tn10(TetR) Amy CamR}]Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1
产品说明：
XL2-Blue菌株来源于XL1-Blue菌株，为HTE(high transformation efficiency)基因型，HTE是Stratagene开发的特异性提高感受态转化效率及大质粒转化能力的宿主菌基因型，已成功应用于40kd质粒的构建。Hte使得XL2-Blue适用于大质粒DNA和重组产物的转化，降低片段大小的偏爱性，多用于文库构建。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。hsdSMR突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。lacZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素和氯霉素抗性。High5TM系列XL2-Blue感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>1×109cfu/μg。
操作方法：
1. 将XL2-Blue感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少14h。
注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量
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文献和实验的ElectroTen-Blue®电转化感受态细胞，单次反应包装的SoloPack® Gold，以及XL2-Blue MRF´ ，XL1-Blue MRF´ Kan（四环素抗性质粒），XL1-Blue MR（没有F´附加体），克隆有二级结构的SURE细胞等。重点推荐 Stratagene的ElectroTen-Blue（转化效率>3×1010 ）和Novagen的Nova XG Zappers（转化效率>1×1010 ）电转化感受态细胞均具有endA－基因型，保证质粒优质高产；recA－重组缺陷基因型适合
3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR产物进行优化，不需把PCR产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆）。不需在PCR扩增产物上加接头，即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法（Topo TA Cloning Kit）Topo TA克隆原理与TA克隆一样，唯一不同的是TA克隆用的是T
） 利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，在每条PCR 扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆 系统和Topo TA克隆 系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR 产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。 所以TA克隆 不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR 产物进行优化，不需把PCR 产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确
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