- ￥3300
- VAL601
- 12.5-800
- 3.8 pg/mL
- VAL601
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 询价记录
- 技术资料
- 灵敏度：
3.8 pg/mL
- 样本：
Cell culture supernatant, serum
- 标记物：
IL-1 beta
- 适应物种：
Mo
- 应用：
VAL601
- 检测方法：
定量检测天然和重组小鼠 IL-1β的含量
- 检测范围：
12.5-800
- 库存：
2
- 供应商：
上海研卉生物科技
- 规格：
96t
Mouse IL-1 beta Valukine ELISA Kit、
产品信息及操作手册
小鼠 IL-1β ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL601
适用于定量检测天然和重组小鼠 IL-1β的含量
科研专用，不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
18
I. 背景
白细胞介素1（IL-1）蛋白家族包含经典成员IL-1α、IL-1β和IL-1ra，以及IL-18、IL-33
和IL-1F5-10。IL-1α和IL-1β结合于相同的细胞表面受体，共享生物学功能（1）。除了
皮肤角质形成细胞、一些上皮细胞以及中枢神经系统的某些细胞之外，健康小鼠未刺激
的细胞不产生IL-1。但是，作为对炎症物质、感染或微生物内毒素的应答，巨噬细胞以
及其他多种细胞会大量产生IL-1。在免疫应答与炎症反应、骨重建、发热、糖代谢、生
长激素/IGF-1的生理学过程中，IL-1β起着关键作用。在一系列的病理条件下，包括败血
症、类风湿性关节炎、炎性肠病、急性和慢性髓性白血病、胰岛素依赖型糖尿病、动脉
粥样硬化、神经损伤以及衰老有关的疾病，一直伴有IL-1的异常或持续产生（2-5）。
IL-1α和IL-1β具有结构上相关的多肽，在氨基酸水平上的同源性大约为25%。它们
均被合成为31 kDa大小的前体，然后裂解为成熟的蛋白质，分子量大约为17.5 kDa（6,
7）。Caspase-1/ICEI裂解IL-1β前体是炎症反应中的一个关键步骤（2, 8）。IL-1α和IL-1β
都不含有典型的疏水性信号肽（9-11），但有证据表明这些因子可通过非经典通路分泌
（12, 13）。一部分未加工的IL-1α可在细胞膜上出现，并可能存有生物学活性（14）。
与IL-1α前体不同，IL-1β前体与成熟体相比几乎不具备生物学活性（13, 15）。未加工
和成熟的IL-1β均可从细胞输出。
IL-1α和IL-1β通过与IL-1ra结合的免疫球蛋白超家族受体发挥作用。表达80 kDa的
跨膜I型受体（IL-1 RI）的细胞包括：T细胞、成纤维细胞、角质细胞、内皮细胞、滑液
内层细胞、软骨细胞和肝细胞（16, 17）。表达68 kDa的跨膜II型受体（IL-1 RII）的细
胞包括：B细胞、中性粒细胞和骨髓细胞（18）。这两种IL-1受体的胞外域具有大约28%
的同源性，但显著差异则体现在其胞内域；II型受体的胞内域仅有29个氨基酸，而I型受
体的胞内域却有217个氨基酸。IL-1 RII对于IL-1不产生信号，可能做一个诱骗受体减弱
IL-1功能（19）。IL-1受体辅助蛋白（IL-1 RAcP）与IL-1 RI相关，为IL-1 RI信号转导所
必需（20）。IL-1ra是一个分泌性分子，起到IL-1竞争性抑制剂的作用（21, 22）。在人
血浆、关节滑液以及多种人细胞系的条件培养基中可以检出可溶性IL-1 RI和IL-1 RII（23,
24）。此外，类似于可溶性IL-1 RII的IL-1结合蛋白能够由牛痘和牛痘病毒编码产生（25）。
I. 背景
白细胞介素1（IL-1）蛋白家族包含经典成员IL-1α、IL-1β和IL-1ra，以及IL-18、IL-33
和IL-1F5-10。IL-1α和IL-1β结合于相同的细胞表面受体，共享生物学功能（1）。除了
皮肤角质形成细胞、一些上皮细胞以及中枢神经系统的某些细胞之外，健康小鼠未刺激
的细胞不产生IL-1。但是，作为对炎症物质、感染或微生物内毒素的应答，巨噬细胞以
及其他多种细胞会大量产生IL-1。在免疫应答与炎症反应、骨重建、发热、糖代谢、生
长激素/IGF-1的生理学过程中，IL-1β起着关键作用。在一系列的病理条件下，包括败血
症、类风湿性关节炎、炎性肠病、急性和慢性髓性白血病、胰岛素依赖型糖尿病、动脉
粥样硬化、神经损伤以及衰老有关的疾病，一直伴有IL-1的异常或持续产生（2-5）。
IL-1α和IL-1β具有结构上相关的多肽，在氨基酸水平上的同源性大约为25%。它们
均被合成为31 kDa大小的前体，然后裂解为成熟的蛋白质，分子量大约为17.5 kDa（6,
7）。Caspase-1/ICEI裂解IL-1β前体是炎症反应中的一个关键步骤（2, 8）。IL-1α和IL-1β
都不含有典型的疏水性信号肽（9-11），但有证据表明这些因子可通过非经典通路分泌
（12, 13）。一部分未加工的IL-1α可在细胞膜上出现，并可能存有生物学活性（14）。
与IL-1α前体不同，IL-1β前体与成熟体相比几乎不具备生物学活性（13, 15）。未加工
和成熟的IL-1β均可从细胞输出。
IL-1α和IL-1β通过与IL-1ra结合的免疫球蛋白超家族受体发挥作用。表达80 kDa的
跨膜I型受体（IL-1 RI）的细胞包括：T细胞、成纤维细胞、角质细胞、内皮细胞、滑液
内层细胞、软骨细胞和肝细胞（16, 17）。表达68 kDa的跨膜II型受体（IL-1 RII）的细
胞包括：B细胞、中性粒细胞和骨髓细胞（18）。这两种IL-1受体的胞外域具有大约28%
的同源性，但显著差异则体现在其胞内域；II型受体的胞内域仅有29个氨基酸，而I型受
体的胞内域却有217个氨基酸。IL-1 RII对于IL-1不产生信号，可能做一个诱骗受体减弱
IL-1功能（19）。IL-1受体辅助蛋白（IL-1 RAcP）与IL-1 RI相关，为IL-1 RI信号转导所
必需（20）。IL-1ra是一个分泌性分子，起到IL-1竞争性抑制剂的作用（21, 22）。在人
血浆、关节滑液以及多种人细胞系的条件培养基中可以检出可溶性IL-1 RI和IL-1 RII（23,
24）。此外，类似于可溶性IL-1 RII的IL-1结合蛋白能够由牛痘和牛痘病毒编码产生（25）。
19
II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠IL-1β单抗包被于微孔板上，样品和标准品
中的小鼠IL-1β会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；加入辣根过氧化酶标
记的抗小鼠IL-1β多抗，未结合的抗体被洗去；加入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜
色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用，不可用于体外诊断；
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和小鼠血清；
请在试剂盒有效期内使用；
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠IL-1β单抗包被于微孔板上，样品和标准品
中的小鼠IL-1β会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；加入辣根过氧化酶标
记的抗小鼠IL-1β多抗，未结合的抗体被洗去；加入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜
色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用，不可用于体外诊断；
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和小鼠血清；
请在试剂盒有效期内使用；
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
20
III. 优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的两个样本，在同一板内分别检测20次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测20次，以确定板间精确度。
III. 优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的两个样本，在同一板内分别检测20次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测20次，以确定板间精确度。
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的小鼠IL-1β，测定其回收率。回收率范
围在69-102%，平均回收率在77%。
在小鼠血清样本中掺入检测范围内不同水平的小鼠IL-1β，测定其回收率。回收率范围
在83.2-97.4%，平均回收率在88.1%。
C. 灵敏度
小鼠IL-1β的最低可测剂量（MDD）一般小于3.8 pg/mL。
MDD是根据20个标准曲线零点吸光值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组小鼠IL-1β蛋白所校
正。
E. 线性
不同的样本中含有或掺入高浓度的小鼠IL-1β，然后用标准品稀释液（1×）将样本稀释
到检测范围内，测定其线性。
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的小鼠IL-1β，测定其回收率。回收率范
围在69-102%，平均回收率在77%。
在小鼠血清样本中掺入检测范围内不同水平的小鼠IL-1β，测定其回收率。回收率范围
在83.2-97.4%，平均回收率在88.1%。
C. 灵敏度
小鼠IL-1β的最低可测剂量（MDD）一般小于3.8 pg/mL。
MDD是根据20个标准曲线零点吸光值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组小鼠IL-1β蛋白所校
正。
E. 线性
不同的样本中含有或掺入高浓度的小鼠IL-1β，然后用标准品稀释液（1×）将样本稀释
到检测范围内，测定其线性。
F. 样本预值
细胞培养上清液 - 培养在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中J774A.1细胞，用 2.5
μg/mL LPS和100 ng/mL rmGM-CSF来刺激。细胞铺板浓度为3.5×106 cell/mL。培养 6
天后，取上清液，测得IL-1β的量为898 pg/mL。
血清样本 - 使用本试剂盒检测了4份鼠血清样本中IL-1β的水平。4份样本的检测值均低
于最低标准品，12.5 pg/mL。
G. 特异性
此ELISA法可检测天然及重组小鼠IL-1β蛋白。将以下因子配制成 50 ng/mL的浓度来检
测与小鼠IL-1β的交叉反应。将50 ng/mL的干扰因子掺入中间范围的重组小鼠IL-1β对照
品中，来检测对小鼠IL-1β的干扰。没有观察到明显的交叉反应或干扰。
重组小鼠蛋白
IL-1α IL-1Hy2
IL-1Ra IL-3
IL-1R1 IL-4
IL-1R2 IL-5
IL-1R6 IL-9
IL-1R9
细胞培养上清液 - 培养在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中J774A.1细胞，用 2.5
μg/mL LPS和100 ng/mL rmGM-CSF来刺激。细胞铺板浓度为3.5×106 cell/mL。培养 6
天后，取上清液，测得IL-1β的量为898 pg/mL。
血清样本 - 使用本试剂盒检测了4份鼠血清样本中IL-1β的水平。4份样本的检测值均低
于最低标准品，12.5 pg/mL。
G. 特异性
此ELISA法可检测天然及重组小鼠IL-1β蛋白。将以下因子配制成 50 ng/mL的浓度来检
测与小鼠IL-1β的交叉反应。将50 ng/mL的干扰因子掺入中间范围的重组小鼠IL-1β对照
品中，来检测对小鼠IL-1β的干扰。没有观察到明显的交叉反应或干扰。
重组小鼠蛋白
IL-1α IL-1Hy2
IL-1Ra IL-3
IL-1R1 IL-4
IL-1R2 IL-5
IL-1R6 IL-9
IL-1R9
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