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- 2025年10月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Cell Cycle Assay Kit - PI/RNase Staining
- 供应商：
上海研卉生物科技有限公司
- 规格：
500T
Cell Cycle Assay Kit - PI/RNase Staining——细胞周期检测试剂盒（PI/RNase Staining）
概述：
DNA含量分析在流式细胞检测中，占有相当大的比例。通过这种方法，研究者可以进行抗癌药物的毒性评估，并对恶性肿瘤细胞的预后效果及进展程度进行分析。在细胞周期检测中，DNA含量也同样作为重要的分析手段而被广泛应用。通过细胞DNA含量的测定，可计算各细胞周期的百分率，也可通过DNA片段化检测、DNA双染标记等方法检测细胞凋亡。
Cell Cycle Assay Kit - PI/RNase Staining试剂盒，可快速完成细胞周期的分析，操作简便。本产品使用碘化丙啶（PI）作为DNA荧光染料，通过流式细胞术得到细胞周期中G0/G1，G2和S期细胞的比例。
50 tests：
- PI Solution 1.25 ml
- RNase Solution 0.125 ml
- Assay Buffer 25 ml
0-5℃避光
- 流式细胞仪（碘化丙啶PI:λex=535 nm，λem=617 nm）
- 37℃培养箱
- PBS缓冲液
- 1.5 ml微量管
- 100-1000 μl、20-200 μl、2-20 μl移液器
本产品在固定细胞及不细胞固定的情况下皆可使用。
取500 μl Assay Buffer 后，分别加入25 μl PI Solution和2.5 μl RNase Solution。
配置好的工作液1天内用完。
操作步骤：
非固定细胞
1、 将细胞密度调整为1～5×106 cells/mla）
。2、 取1 ml的细胞悬液加入到1.5 ml微管中，在1,000× g离心3min。b）
3、 弃上清液后加入1 ml PBS缓冲液清洗细胞，在1,000× g离心3min。
4、 弃上清液后加入0.5 ml Working Solution。
5、 在4℃避光培养30 min。
6、 涡旋振荡使细胞分散，在37℃避光培养30 min。
7、 涡旋振荡使细胞分散，用尼龙筛网过滤，以去除样品中的细胞团块c）。
8、 用流式细胞仪检测。
b) 根据不同的细胞种类，需适当调整转速与离心时间。
c) 样品处理后，剩余部分无法继续保存并使用。
1. 将细胞密度调整为1～5×106 cells/mla）。
2. 取1 ml的细胞悬液加入到1.5 ml微量管中，在1,000× g离心3min。
3. 弃除上清，并在细胞团中加入1ml的-20℃保存的70%乙醇。
4. 涡旋振荡使细胞分散，4℃下静置2 hb）。
5. 离心3min、1,000 g后，去除乙醇c）。
6. 加入1 ml PBS缓冲液清洗细胞，在1,000× g离心3min。
7. 弃上清液后加入0.5 ml Working Solution。
8. 涡旋振荡使细胞分散，37℃避光培养30 min。
9. 涡旋振荡使细胞分散，4℃避光培养30 min。
10. 涡旋振荡使细胞分散，使用尼龙筛网过滤，以去除样品中的细胞团块d)。
b) 根据不同的细胞种类，需适当调整固定时间。
c) 根据不同的细胞种类，需适当调整转速与离心时间。
d) 样品处理后可以在4°C以下保存并继续使用，但是保存时间长短与细胞种类有关。
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文献和实验FIXATION and DNA Staining for Cell Cycle Analysis
BackgroundThis method of DNA staining utilizes ethanol to fix the cells and permeabilize the membrane, which allows the dye (Propidium Iodide) to enter the cells. Propidium Iodide (PI) is a DNA-binding fluorochrome that intercalates in the double
A general protocol for staining cell for cytometry analysis
General Annexin V Staining Procedure Solutions 1.10X Binding Buffer (Cat. No. 66121A):0.1 M HEPES, pH 7.4; 1.4 M NaCl; 25 mM CaCl 2 . Dilute to 1× prior to use. 2. Propidium Iodide (PI). Prepare a 50 µg/ml stock solution of PI in 1× PBS buffer
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
