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- Y6002
- 2025年12月17日
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- 详细信息
- 技术资料
- 英文名：
YF®488-Annexin V and PI Apoptosis Kit
- 库存：
10
- 供应商：
研卉生物
- 规格：
50T
产品内容：
| 组分 |
50T |
100T |
| A. 1×Annexin V 结合缓冲液 |
25 mL |
50 mL |
| B. YF488A-Annexin V |
250 μL |
500 μL |
| C. PI |
250 μL |
500 μL |
储存条件:
光谱特性：
PI: Abs/Em = 535/617 nm (with DNA)
产品介绍：
YF488-Annexin V 和 PI 凋亡试剂盒提供了一种快速简便的方法，通过标记早期凋亡细胞（绿色）和坏死细胞（红色），用于检测细胞凋亡水平。产品可以使用流式细胞仪或其它荧光检测设备进行检测。
YF488-Annexin V可以标记凋亡细胞。Annexin V 选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称 PS)。在细胞发生早期凋亡时，PS 会外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。用绿色荧光探针YF488 标记的 Annexin V，即 YF488 -Annexin V，可以结合外翻的磷酯酰丝氨酸，从而检测细胞凋亡的重要特征。我们公司的 YF488 染料与荧光素/FITC 相比，荧光亮度更高，且不受环境中 pH 的影响，具有良好的光稳定性。
碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种 DNA 结合染料，它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞的细胞核。PI 可以由 488,532 或 546 nm 的激光激发，呈现红色荧光。
◆为何染色结果显示细胞凋亡率过高？
1.凋亡时间处理过长，使细胞全部死亡。建议重新摸索细胞凋亡条件，使细胞处于不同的凋亡状态。
2.假阳性染色。对于贴壁细胞，胰蛋白酶消化时间过长或机械刮擦细胞会暂时破坏质膜，使Annexin V能够与磷脂酰丝氨酸结合。建议在胰蛋白酶消化或机械刮擦细胞后，使细胞在最佳细胞培养条件和培养基中培养约30分钟，以恢复其膜完整性。
◆实验结果使用什么仪器观察？
实验结果可以通过流式细胞仪和荧光显微镜进行观察，但更推荐使用流式细胞仪。因为正常的细胞和凋亡的细胞膜上都有磷脂酰丝氨酸（PS），只是凋亡细胞膜外更多，可以结合更多的Annexin V，流式细胞仪更灵敏，可以区分出微小差异，将正常细胞与凋亡细胞分成不同的两群，但如果用荧光显微镜，可能观察不到这一差别，尤其是贴壁细胞。若要在成像测定中检测细胞凋亡，推荐使用SuperView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells（S6007）
◆流式细胞仪检测细胞凋亡，结果图中的各个象限代表什么状态的细胞？
左上角：Annexin V-/PI+，坏死细胞，也可能包含少数的晚期凋亡细胞或机械损伤的细胞；右上角: AnnexinV+/PI+，晚期凋亡细胞；右下角：AnnexinV+/PI-，早期凋亡细胞；左下角：AnnexinV-/PI-，正常细胞。
◆这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗？
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸，包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA，由于RNA的干扰，用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时，凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 若果需要进行细胞周期检测，推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit（C6031）
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