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室温
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12个月
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10
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上海一基
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123334-18-9
本公司长期经营"试剂盒、细胞、酶、血清、抗体、标准品生物试剂、标准品、仪器、耗材、培养基等生物化学试剂。价格实惠,质量有保证。客户可以通过电话、传真、E-mail、网络订购!
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合作单位:
上海华东理工大学、北京医科大学、西南科技大学、江西理工大学、贵州师范大学、北京林业等 。
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文献和实验沉淀,最好弃掉 过硫酸铵(APS)(10%;w/v) 取3g过硫酸铵,溶于去离子水 ,至终体积为30mL。此溶液4℃下在短暂的数日内是稳定的,但建议,对每一组新胶均应新鲜配制 但摇动溶液时不要过于剧烈以免引入过多地氧气 二.样品处理 先制备蛋白样品,后灌注压缩胶,压缩胶灌注后应在20~40min内使用。 上样前蛋白样品最好离心,上样量不宜过多,以免看结果时,每个条带都弯弯地“笑”你贪多嚼不烂哦。其他的操作,按照说明控制电流,不要
取上清,在上清中加异丙醇1.5ml,盖上盖,颠倒数次以混匀;室温下孵育至少10分钟,4℃,12000g离心10分钟;弃上清,洗涤沉淀的蛋白质3次[每次用0.3M胍盐酸盐(95%乙醇溶解)2ml重悬蛋白质;室温下孵育20分钟;样本离心,4℃,7500g,5分钟;弃上清];加2ml 100%乙醇,洗蛋白小粒,室温孵育20分钟后4℃,7500g离心5分钟;弃上清;风干或真空抽干5-10分钟;用1%SDS(用量根据蛋白小粒大小决定)溶解蛋白小粒,用吸管反复吸打溶液,50℃孵育以完全溶解蛋白质;10000g 4℃离心
-Sep 尺寸排斥柱(Princeton Separation, Adelphia,NJ)。 ( 13 ) L-甲苯磺酰氨-2-苯乙基氯甲基酮处理过的胰蛋白酶(Pierce,Beverly,MA)。 ( 14 ) 磷酸缓冲液(PBS):10X 储备液,每升含:80 g 氯化钠、2 g 氯化钾、11.5 g 磷酸氢二钠水合物( Na2HPO4·7H2O ) 和 2 g 磷酸二氢钾。 ( 15 ) 1 mol/L 氯化镁。 ( 16 ) 50 mmol/L Tris-氯化氢,pH
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