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文献和实验1. 实验原理 过碘酸是氧化剂,使含有乙二醇基(-CHOH—CHOH)的多糖类物质(糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等)氧化,形成双醛基(—CHO—CHO)。醛基与雪夫试剂中的无色品红结合,使无色的品红变成紫红色化合物,定位于含有多糖类的细胞内。 2. 标本采集 2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史。凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎症或有畸形,晚期
染色,基本原理是通过应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的显色试剂,定位地显示组织细胞的特殊化学成分并保持原有的形态学改变,对一些代谢性疾病的诊断具有一定的参考价值。通过光镜或电镜观察,可以检测组织切片内的蛋白质、糖类、脂类、酶类、核酸与某些金属元素等。 1.过碘酸雪夫氏染色(periodic acid-schiff stain,PAS染色):过碘酸是一种氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1.2乙二醇基使之变为二醛,醛与Schiff氏试剂结合,形成红色的取代色素而得到定位。PAS染色可显示
作为管家基因对照。通过3次重复实验计算靶基因的平均表达水平。采用2^-ΔΔCT法计算靶基因相对于GAPDH的表达量。 4.器官特异性功能 ①ALPI检测:使用商用碱性磷酸酶显色试剂盒或免疫细胞化学法检测。吸去培养类器官的培养基,用等体积PBS洗涤2次,用4%PFA固定。按照试剂盒说明书进行ALPI染色,根据染色强度判断检测结果。 ②黏蛋白检测:使用商用AB-PAS或黏蛋白染色试剂盒检测。吸去培养类器官的培养基,用等体积PBS洗涤2次,用4%PFA固定。按照试剂盒说明书进行AB-PAS或黏
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