- ￥320
- 上海一基
- 上海
- BM262327
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
12个月
- 库存：
10
- 供应商：
上海一基
- CAS号：
9025-24-5
- 规格：
1mg
规格：10mg；100mg；1g；包装规格可根据客户要求定制
一、产品简介：
羧肽酶B(Carboxypeptidase B，EC3.4.17.2)是一种外分泌蛋白酶，属于金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族，每分子含有一个Zn原子，可特异性水解蛋白质C-末端碱性氨基酸（赖氨酸、精氨酸、组氨酸）氨基端的肽键。
本品系重组酵母菌表达、经多步分离纯化后冷冻干燥而成的冻干粉。与牛羧肽酶B同源，具有与其一致的特异性与活性。但本品无动物病毒及其他杂酶污染，可替代动物源性羧肽酶B用于各种生物技术过程中。重组 CPB 的活性受到典型的金属螯合剂如 EDTA，及Cu2+，Hg2+抑制，Zn2+、Mn2+等金属离子能够不同程度提高酶活。CPB 的最适 pH 为 8.0，偏酸或偏碱均会造成活性下降，pH 接近 5.0时活性接近零，pH>12.0 时活性完全丧失。CPB 在一定温度内（<60℃）活性随温度升高而上升。
二、产品特性：
来源: 毕赤酵母
性状: 白色或类白色冻干粉
分子量：35 KD±3.5 kD
纯度（SDS-PAGE）:单一主条带
外源DNA残留：<100ng/mg pro
菌体蛋白残留：<100ng/mg pro
比活:≥100U /mg pro
特异性：专一水解蛋白质C-末端碱性氨基酸（赖氨酸、精氨酸、组氨酸）
三、产品用途：
重组羧肽酶B可用于胰岛素及类似物的生产，重组抗体的质量检测，蛋白质C-末端氨基酸的测定，小分子蛋白或多肽的生产，如美容肽，抗菌肽、食品风味肽的生产等，及对某些特殊化合物进行酶促合成。
四、使用方法：
推荐使用25mM Tris-HCl（pH 7.6）溶解重组羧肽酶B冻干粉，使酶液浓度为1-10mg/ml；酶量：目的蛋白（质量比）=1:50-1:1000，反应pH为7.5-9.0，反应温度25~35℃。
五、储存稳定性：
于2-8℃以下储存，24个月内稳定；当Tris-HCl缓冲液配制成酶溶液时，于-20℃反复冻融5次无活性损失。
六、产品优势：
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。
纯度高：不含其他蛋白酶，无非特异性切割。
产量高：吨级罐生产，适合工业客户生产。
支持定制：规格可根据客户需求定制
七、注意事项和免责声明
本品具有吸潮性，应室温平衡后再取用。
本品不得用于临床诊断和治疗。
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文献和实验的切割，半球形前导肽被切割后，它既不会抑制酶体，也不再与之结合，这使得酶体能迅速发挥功能，并对前导肽 C-端的 Arg 进行切割。 （上面暗红色部分代表前肽，下面蓝色部分代表羧肽酶 B，箭头所指为胰蛋白酶酶切激活位点）羧肽酶 B 的性质取重组羧肽酶 B 冻干粉。研究了重组羧肽酶 B 的最适 pH，最适温度，pH 稳定性及温度稳定性，对于 CPB 的使用起到指导作用。同时做了溶液的反复冻融稳定性，对于 CPB 酶液的储存和使用起到指导作用。 1、羧肽酶 B 的 pH 稳定
为recA+，质粒DNA易发生突变，DH5α或JM109，XL1-blue菌株为重组缺陷性菌株，可稳定扩增已鉴定的重组质粒），扩增细菌并纯化质粒。 三、重组病毒质粒转导293细胞 1、293细胞培养：转导24小时前，以方瓶为例，接种2×106 293细胞于25cm2方瓶，使生长密度约50-70%.（也可以使用6孔或96孔板） 2、以PacI单酶切重组病毒质粒（转导25cm2方瓶约需4ugDNA），完全线性化后，乙醇沉淀，再以20 ul ddH2O溶解。 3、脂质体包裹质粒
为重组缺陷性菌株，可稳定扩增已鉴定的重组质粒），扩增细菌并纯化质粒。 三 重组病毒质粒转导 293 细胞 1 293细胞培养：转导24小时前，以方瓶为例，接种2×106 293细胞于25cm2 方瓶，使生长密度约50-70%。（也可以使用6孔或96孔板） 2 以PacI单酶切重组病毒质粒（转导25cm2 方瓶约需4µgDNA），完全线性化后，乙醇沉淀，再以20 µl ddH2 O溶解。 3 脂质体包裹质粒（以Lipofectamine为例）:每4µ
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