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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海莼试
- 库存:
15
- 靶点:
Calpain 12
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
详见说明书
- 抗体英文名:
Anti-Calpain 12
- 抗体名:
钙激活蛋白酶12抗体
- 标记物:
HRP等
- 宿主:
鼠,牛,马,兔,羊等
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat等
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体或固体
- 应用范围:
WB IHC-P IHC-F IF
- 浓度:
10mg/ml
- 保存条件:
密封保存
- 规格:
100ul
| 中文名称: | 钙激活蛋白酶12抗体 |
| 英文名称: | Anti-Calpain 12 |
| 库存地: | 上海库 |
| 供应: | 现货 |
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关于杂交瘤单克隆抗体制备的问答:
☆ 问:小鼠腹腔制备的单抗为什么不能直接用于人体治疗?
答:小鼠的单克隆抗体是鼠源性的,人的机体免疫对其会有严重的排斥反应,所以非人源化得抗体是不能直接用于人体的。
☆ 问:制备单抗时,为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞?
答:因为B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力,但不能在体外增殖;骨髓瘤细胞是一种癌细胞,它能在体外培养条件下无限增殖,但不能产生抗体。因此将二者融合,产生杂交瘤细胞,它会兼有两个亲本细胞的特性。
☆ 问:杂交瘤细胞注射入小鼠体内为了得到单抗.瘤细胞的无限增殖,是否会导致小鼠的死亡?
答:在把杂交瘤细胞注入小鼠体内前,要提前打入石蜡油或是不完全佐剂的,数量也会增殖,不会形成实体瘤,可以诱导机体产生腹水。
☆ 问:什么是全人单克隆抗体?与人源单克隆抗体有什么区别?
答:人单克隆抗体的过程和鼠的单抗一样,只是采用认得B细胞和人的瘤细胞.全人单克隆抗体不存在鼠源性异种蛋白的抗原性,不会被人体免疫系统攻击。
☆ 问:小鼠骨髓瘤细胞用骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合答:骨髓瘤细胞是一种癌细胞,他对小鼠造成伤害就是通过不断增殖造成的.所以最后小鼠会腹水,这时候可以从腹水中提取单克隆抗体,小鼠最终会因为骨髓瘤细胞过度繁殖死亡。
☆ 问:杂交瘤细胞在小鼠体内能存活多久?
答:杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成,可以像肿瘤细胞一样无限增值,也可以像B细胞分泌抗体,于是他就会一直存活下去,直到小鼠死亡。
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文献和实验用2 h室温孵育 12. 加入100μl Protein A琼脂糖珠来捕捉抗原抗体复合物,4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温1h,如果所用抗体为鼠抗或鸡抗,建议加2 μl"过渡抗体"(兔抗鼠IgG,兔抗鸡IgG) 13. 14000rpm瞬时离心5s,收集琼脂糖珠-抗原抗体复合物,去上清,用预冷的RIPA buffer洗3遍,800μl/遍,RIPA buffer有时候会破坏琼脂糖珠-抗原抗体复合物内部的结合,可以使用PBS 14. 用60μl 2×上样缓冲液将琼脂糖珠-抗原抗体复合物悬起,轻轻混匀
用2 h室温孵育 。 12. 加入100 μl Protein A琼脂糖珠来捕捉抗原抗体复合物,4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温1 h,如果所用抗体为鼠抗或鸡抗,建议加2 μl“过渡抗体”(兔抗鼠IgG,兔抗鸡IgG) 。 13. 14000 rpm 瞬时离心5 s,收集琼脂糖珠-抗原抗体复合物,去上清,用预冷的RIPA buffer洗3遍,800 μl/遍,RIPA buffer有时候会破坏琼脂糖珠-抗原抗体复合物内部的结合,可以使用PBS 。 14. 用60 μl 2×上样
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