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- 上海一基
- 上海
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- 2025年07月14日
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上海一基实业有限公司
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文献和实验检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测，我们通常使用碱性磷酸酶（AP）耦联的抗体，采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中，我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测，NBT/BCIP用于显色法检测。同时，对于膜杂交中的化学发光信号的检测，建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 检测底物 即用型CDP
02 AP 作为一种经典且常用的显色交联酶，AP的底物明显更稳定，而且在封闭良好的情况下，其显色灵敏度也达低pg水平。 BCIP NBT BCIP/NBT BCIP/INT 作用 与O2反应形成沉淀 氧化反应 在AP的催化下，BCIP会被水解而与NBT发生反应 氧化反应 灵敏度 100pg 100pg 30pg
， 5~10min/次?→ECL显影或NBT/BCIP显色。结果如图9-2： 2 荧光分光光度计分析 原理：活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物，水解D4-X肽键。根据这一特点，设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC。在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小，可以测定caspase-3的活性，从而反映Caspase-3被活化的程度。方法：收获细胞正常
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