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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
688
- 英文名:
Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Human (FITC)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
400T|800T|1600T
特别提示:包括免疫荧光试剂盒(人源一抗)(FITC)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:免疫荧光试剂盒(人源一抗)(FITC)
英文名称:Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Human (FITC)
产品规格:400T|800T|1600T
本试剂盒采用SABC系统,是专为免疫化学而设计的,用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-FITC代表了传统的免疫荧光方法。荧光具有简便快速,不需显色既可直接观察的优点。但染色不能保存,敏感性较低是其缺点。将链霉亲和素—生物素引入荧光系统,能明显提高敏感性及降低背景。FITC 激发光波长为 490-495nm,发射光波长为 520-530nm,呈黄绿色荧光。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 正常浓缩兔血清(效价1:10) | 2.5ml/5ml/10ml |
| 生物素标记兔抗人IgG(效价1:100~200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
| SABC-FITC(效价1:100~200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
另附有三个滴瓶可供稀释试剂用
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭:滴加稀释的正常血清封闭液(稀释比 1:10),室温 20 分钟。甩干,勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记兔抗人IgG(参考效价1:100-200),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC- FITC(参考效价1:100-200),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验一抗的免疫荧光染色,我们需要考虑抗体的建议稀释度,以实现高的信噪比。若抗体浓度过低,则荧光信号较弱,可能难以与背景区分开,但抗体浓度过高,则会导致较高的背景染色。另外,要注意各步骤之间的彻底洗涤的重要性,利用生理溶液来洗涤,可去除未结合的荧光试剂,或那些只是粘在目标上而非特异性结合的荧光试剂,从而提高信噪比。最后需要注意的是,标记好荧光的细胞片应尽早观察,或者用封片剂封片后在 4℃ 或- 20℃ 避光保存,以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果。尽管免疫荧光技术提供了准确的结果,但也存在
系统。在一些荧光检测方案中,则需要选择不同的荧光标记;而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。艾美捷能为您提供上述所有不同类型标记的二抗。 【是否经过血清吸附过的二抗】 为减少二抗与样本的非特异性结合,艾美捷还能为您提供不同血清吸附的原装进口二抗。如您的检测样本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗就需要选择抗小鼠源的二抗,如果您对实验的特异性要求很高,那我们向您推荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗,这种二抗由于经过人血清吸附而排除了与人源组织(如IgG等)可能发生非特异性反应的IgG
磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用Biotin/Avidin检测系统。在一些荧光检测方案中,则需要选择不同的荧光标记;而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。艾美捷能为您提供上述所有不同类型标记的二抗。 【是否经过血清吸附过的二抗】 为减少二抗与样本的非特异性结合,艾美捷还能为您提供不同血清吸附的原装进口二抗。如您的检测样本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗就需要选择抗小鼠源的二抗,如果您对实验的特异性要求很高,那我们向您推荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗
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