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- 百奥莱博
- JN0048-KFG
- 北京
- 2025年07月16日
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905
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长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别提示：包括2×BloTaq PCR MasterMix(血液直接PCR)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：2×BloTaq PCR MasterMix(血液直接PCR)
产品规格：1ml
Blo Taq是截短后的Taq DNA聚合酶，它缺失了5"-3"外切酶活性。Blo Taq还有其它突变，这些突变使它能够耐受全血中存在的抑制剂。此酶能够扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先提纯。Blo Taq可耐受高达体系中10%的全血。在大多数抗凝剂存在下Blo Taq依然表现良好，包括肝素、柠檬酸和EDTA。本制品是将PCR反应所需的Blo Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物，专为常规PCR扩增反应优化。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，大大地简化了操作过程，减少了PCR操作过程的污染。2X Blo Taq PCR MasterMix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试，染料的加入不影响PCR反应，在PCR反应完成后可直接电泳，节省时间。
产品特点：
简便：直接用血液为模板扩增目的基因，无需事先提纯（图例一）。
高效：有效减少了杂带产生，从而实现高特异性的PCR。
稳定：经测试，反复冻融40 次后，扩增性能仍不受影响。
产品用途：
1、直接用血液为模板进行PCR 扩增目的基因，可进行血液相关基因疾病的快速诊断；
2、基因组扩增检测。
使用建议：建议使用时添加≤10%的全血为模板，加上血液后建议用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。
应用实例：
图例一）以人全血（EDTA 抗凝）为模板，加入不同血液量扩增
泳道1：10%全血
泳道2：5%全血
泳道3：2%全血
泳道4：0%全血
泳道M：DL2000 Marker
常用反应体系（50μl）
| 成分 | 体积 |
| 2×BloTaq PCR MasterMix | 12.5μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 全血 | 0.1-2.5ul |
| ddH2O | 至25μl |
| *Mg2+终浓度为3.75mM | |
常用PCR循环：
| 当扩增片段<3K： | |
| 94℃ | 1分钟30秒 |
| 30次循环 | 94℃，20秒 55℃，20秒 72℃，60秒/kb |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
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文献和实验的PCRMIX，是目前最“傻瓜”的 PCR 反应体系之一，不论是质粒、菌液、CDNA、基因组 DNA、或者是直接裂解的粗提物，GC 含量高达 75% 的模板，都能轻松扩增，不需要费力的“摸条件”！ 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液，浓度为 2x。DNA 扩增时，只需加入模板，引物和水，使 MasterMix 溶液的浓度为 1× 即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行 PCR 扩增可以减少操作时间，避免因多步操作带来的污染，特别适宜高通量筛选基因的扩增
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。 一、组织切片和细胞样品的制备 试剂与配置 10%福尔马林；二甲苯；PBS 操作方法 1. 用10%福尔马林固定组织8~15hr，石蜡包埋，切片（4μm），将切片置于新鲜的二甲苯中处理5min，放入无水乙醇中浸泡5min，取出，空气
由于全血中存在有很多PCR反应抑制物，例如，血红素，蛋白质，盐，抗凝剂等，使得常规的Taq聚合酶不能从全血中直接进行PCR反应。因此，现在临床上往往先要从全血中提取DNA, 但即使这样，也不能完全克服上述抑制物的影响，这也是为什么目前临床上的DNA扩增反应，常常失败的原因如果在遗传病诊断中，能够从全血中快速有效地进行DNA扩增，可以节省大量的人力，时间，费用，对临床遗传病鉴定，以及亲子鉴定是一个革命化的改进。KAPA全血直接PCR：是世界上首个专门为全血PCR改造的高效DNA多聚酶。通过直接
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