PCR产物纯化回收试剂盒(测序级)

特别提示：包括PCR产物纯化回收试剂盒(测序级)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：PCR产物纯化回收试剂盒(测序级)
产品规格：100次

  本试剂盒利用核酸外切酶I和热敏碱性磷酸酶，仅需简单的保温步骤，方便地去除多余的引物和dNTPs，净化的PCR产物可直接用于测序反应，且不会

损失任何产物。此法可以避免繁琐的胶回收、柱纯化、沉淀、磁珠、过滤、透析等方法，大大节省实验费用及时间。适用于大规模PCR产物净化测序，大幅提高实

验效率。

为什么设计本试剂盒：
对PCR产物的测序通常需要对PCR产物进行胶回收、柱纯化等处理，不仅成本高，操作复杂，而且还必然损失一定量的产物。在PCR产物不易获得的情况下，采用以

上方法往往会使实验的费用和时间成倍增加。如果能对PCR产物直接测序将解除这些烦恼。

试剂盒组份：

组成	体积
核酸外切酶I（20U/μl）	50μl
热敏磷酸酶（5U/μl）	100μl
10×AP Buffer	1ml

本试剂盒设计原理：
PCR反应结束后，由于产物里一般还残留着引物及dNTPs，这些残留物会阻碍测序反应的进行，如果去除它们，就可以实现对PCR产物的直接测序。热敏碱性磷酸酶

可以分解残余的dNTPs，而核酸外切酶I可高特异性地分解单链DNA，而对双链DNA无作用。用这两种酶对PCR产物进行“净化”后，可彻底降解残留引物及dNTPs，

随后的80℃保温过程 完全灭活核酸外切酶I和热敏碱性磷酸酶，使净化后的产物可直接用于测序反应。

操作步骤：
1、取出7.5μl PCR反应混合物；
2、在反应混合物中加入0.5 μl (10 units)的核酸外切酶 I (20000 units/ml), 37℃反应15分钟；
3、再加入1μl的10×AP Buffer 和1μl (5 units) 热敏磷酸酶，37℃反应15分钟；如果反应时间延长，可减少酶用量，需试验验证。热失活核酸外切酶 I和热

敏磷酸酶：80℃保温20分钟，终止反应。反应物可直接用于测序。