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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
399
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
500μl|5×500μl
特别提示:包括2×Taq plus MasterMix在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:2×Taq plus MasterMix
产品货号:2×Taq plus MasterMix
产品规格:500μl|5×500μl
本产品包含Taq plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可最大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板(如GC含量高,有二级结构)的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基,可以直接用于TA克隆。以50μl PCR反应体系为例,每次使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反应。
质量控制:经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余基因组DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用方法;
1、冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 50μl反应体系 | 终浓度 | |
| 2×MasterMix | 25μl | 1× |
| 上游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
| 下游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
| 模板 | ×μl | 10pg-1μg |
| 水 | 补至50μl |
3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注:PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
6、电泳检测。
注:使用含染料的2×MasterMix可以直接上样;不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
除了2×Taq plus MasterMix,,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN130506 | PCR级海藻糖溶液 | 1.5mL |
| BTN60901 | 可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂 | 0.3mL |
| BTN70909 | PCR级绿如蓝DNA染料 | 0.1mL |
| BTN70905 | 2%明胶溶液(PCR级) | 1.5mL |
| BTN90708 | 即用型高保真PCR试剂盒 | 1.5mL |
| BTN100814 | Oligo dT12-18引物(0.5μg/μL) | 5μg |
| BTN100203 | 通用型LAMP试剂盒 | 50次 |
| BTN91107 | SP6体外转录试剂盒 | 50次 |
| YT390 | dNTP混合溶液(2.5mM) | 1ml |
| YT402 | 核酸酶/RNA/DNA清除剂(喷雾清除剂) | 250ml |
| WE0101 | Taq DNA Polymerase | 500U|2500U|10000U |
| WE0105 | BAmp DNA Polymerase | 500U |
| WE0118 | 结核分枝杆菌基因分型试剂盒(VNTR-9) | 50次 |
| WE0141 | 快速实时荧光定量PCR预混体系 | 5ml |
| WE0149 | 一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(低含量ROX校正染料) | 100次 |
| WE0159 | dNTP混合溶液(10 mM) | 1ml|5ml |
| SY0289 | 耐热逆转录酶I | 2000U |
| SY0293 | 逆转录酶 | 5000U |
| JN0002 | 第一链cDNA合成试剂盒 | 50次|100次 |
| JN0009 | 反转录引物 | 5OD/2OD |
| JN0026 | 热启动UltraTaq DNA聚合酶 | 250U |
| JN0029 | BloTaq血液DNA聚合酶 | 400U |
| JN0037 | 多重PCR扩增试剂盒 | 50μl(100次) |
| JN0048 | 2×BloTaq PCR MasterMix(血液直接PCR) | 1ml |
| QN0943 | 通用反转录试剂盒(不含Taq酶) | 50T|100T |
| QN0966 | dNTPs Mix(10mM each) | 500μl|1ml|5ml |
| HQF44 | Direct One Tube RT-PCR试剂盒 | 100次/500次 |
| MT0020 | 一步法荧光定量RT-PCR MasterMix(SYBR Green) | 200T|5000T |
| MT0036 | 超纯dNTP混合物(10mM) | 1mL |
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文献和实验bp 片段,以 pBS 菌液为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:菌液 OD600=0.8 时 2 μL /50 μL PCR 扩增程序:同上 a 扩增程序同。 结果:Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix 试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物 10 μL 用 1% 琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二、genomic DNA扩增 1.大肠杆菌DNA扩增 模板:大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序: 循环数 Step 温度
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板:Taq Plus、Long Taq、Taq Platinum 实时荧光定量PCR反应:Taq、Hotstart Taq、Taq Platinum 从菌株或质粒模板,筛选鉴定目的克隆,扩增6kb以下的片段:Taq、Taq Plus、2×Taq PCR MasterMix 模板比较复杂或目的片段丰度低,用普通Taq酶扩增不出条带:2×Taq PCR MasterMix、2×Pfu PCR MasterMix
荧光定量PCR反应(可选产品:Taq、Hotstart Taq、Taq Platinum) 7.从菌株或质粒模板,筛选鉴定目的克隆,扩增6kb以下的片段(可选产品:Taq、Taq Plus、2×Taq PCR MasterMix) 8.模板比较复杂或目的片段丰度低,用普通Taq酶扩增不出条带(可选产品:2×Taq PCR MasterMix、2×Pfu PCR MasterMix)
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