酵母RNA提取试剂盒

特别提示：包括酵母RNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：酵母RNA提取试剂盒
英文名称：Yeast RNA rapid extraction kit

产品货号：酵母RNA提取试剂盒
产品规格：50次

本试剂盒适用于酵母RNA的提取，酵母细胞经溶壁酶处理去除细胞壁后,独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后,RNA选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

本试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯*(代"酚"),氯*等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份：

组份	10次
缓冲液SE	30ml
溶壁酶（10U/μl）	2500U
裂解液RLT	20
去蛋白液RW1	40
漂洗液RW	10
RNase-freeH2O	10ml
吸附柱和收集管	10套

储存条件：室温，有效期12个月(溶壁酶需-20℃保存)。

注意事项
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇，β-巯基乙醇，水浴锅。
4. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般情况下，一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。
浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40

本制品别名：酵母RNA抽提试剂盒|酵母RNA纯化试剂盒

除了酵母RNA提取试剂盒,酵母RNA抽提试剂盒|酵母RNA纯化试剂盒，我公司还供应以下相关产品：



名称：非冻型组织RNA保存液
货号：BTN3060
规格：250mL
本RNA保存液是一种在较高温度下保存RNA样品的非冻型无毒溶液，它能迅速渗入细胞内，通过高效抑制 RNase的活性而保存RNA的完整性。

产品特点：
1. 操作简单，将组织剪薄浸没在RNA保存液中即可使其RNA不被降解。
2. 替代液氮，使样品的保存不需液氮，干冰或-80℃冰箱，尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3. RNA完整，因本产品能迅速抑制组织中RNA酶的活性，故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4. 方便运输，处理过的样品能在 25℃保存一周，使样品邮寄和运输变得容易和便宜，有利学术合作和交流。
5. 反复冻融，经本产品处理的样品可反复冻融20次，其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA的质量。
6. 结果准确，本产品进入细胞十分快速，基因表达在发生应急改变前就得以锁定，故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强，本产品能减少大规模样品处理中的误差，增加各次实验数据间的可比性，对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8. 兼容性广，虽然处理过的样品可以使用动物RNA提取试剂盒和TRIzol等试剂提取其RNA，样品还可直接用于组织切片，免疫学和流式细胞分析而不影响RNA提取的质量。

储存条件：常温运输及保存，有效期二年。

使用方法：

一：用本产品保存新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g组织需10mL)。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3.以最快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方，存放时间不能超过该温度下的最长存放时间，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到最后的温度。注：将样品转移到-20℃或-80℃前，需要倒弃保护液。常见存放温度与其最长存放时间关系为如下：

保存温度	时间及效果
37℃	一天(保存三天的样品 RNA有部分降解)
18-25℃	一周(保存两周的样品 RNA有轻微降解)
2-8℃	一个月
-20℃和-80℃	长期

6.从存放处取出样品(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)，用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA提取或进行其他处理(如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。

二：本产品保存培养细胞、悬浮细胞、细菌和RNA 病毒
1. 标记收集管。
2. 将待样品转移到离心管中，离心收集细胞，弃上清。注:处理含病毒的样品(如血浆)可直接从步骤第4 步开始。
3. 用冰浴的缓冲液洗一次。
4. 将细胞悬浮在少量缓冲液中。
5. 加入五到十倍体积的本产品，混均; 对病毒样品，加入两到三倍体积的本产品，混均。
6. 将收集管存放于温度适当的地方，存放时间不能超该温度下的最长存放时间。
如果要存放在-20℃或-80℃，需先在4℃放置过夜后再转移到最后温度条件(将样品转移到-20℃或-80℃前，需要倒弃保护液)。注:样品存放温度与其最长存放时间关系为如下：

保存温度	时间及效果
37℃	一天(保存三天的样品 RNA 有部分降解)
18-25℃	一周(保存两周的样品 RNA 有轻微降解)
2-8℃	一个月
-20℃和-80℃	长期

7. 取出样品，室温下融化(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)。
8. 加入一倍体积的预冷的缓冲液(如PBS)，用常规离心法收集细胞并用缓冲液洗一次。病毒样品可免去此步骤。
9.细胞直接用于RNA的提取或其他处理。