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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
(R)-(–)-4,12-Bis[di(3,5-xylyl)phosphino]-[2.2]-paracyclophane
- 库存:
4~8周
- 供应商:
嵘崴达
- CAS号:
325168-89-6
- 规格:
100mg
纯度级别:97%
包装规格:100mg
上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,致力于向国内生命科学研究人员提供一流的产品和服务。www.runwelltac.com
我们代理和经销的分子生物学试剂、生化试剂、免疫试剂、细胞培养试剂、制药工业原料、实验仪器与消耗品、临床诊断产品等,已被广泛应用于生命科学基础与开发研究、制药、疾病诊断、人口与健康、生物技术等诸多领域。我们的客户遍布大学、研究所、医院、制药公司、生物技术公司等单位。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右到货。
R&D试剂,周三定货,2-3周到货。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
Millipore试剂,每周三定货,2-3周到货。
Invitrogen试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
ABCAM试剂,周三定货,2-3周到货。
eBioscience试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
STANT CRUZ试剂,周三定货,2-3周到货。
Biolegend试剂,周三定货,2-3周到货。
Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
Amresco试剂,常备现货,3-4周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
Thermo试剂,pierce, Hyclone部分常用现货。
主要经营的耗材品牌:
1. BIOHIT,单道移液半支消毒长期促销,450/支。
2. BD Fa2. BD Falcon耗材,常用常备现货。
3. BRAND,常备现货。
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文献和实验细胞: 完全未编辑的野生型细胞——比例取决于递送效率; 单等位基因编辑、另一等位基因野生型——NHEJ 是独立事件,两个等位基因同时被编辑的概率是各自概率的乘积; 双等位都编辑但都是框内突变——蛋白依然存在,可能保留部分功能; 双等位都编辑且至少有一个移码——部分功能丧失; 双等位均为移码——真正意义上的完全敲除。 问题在于:第 5 类往往是少数派。即使总编辑效率 90%,双等位移码的比例也可能只有 40%–60%。而做表型实验时,只要有 10%–20% 的野生型细胞存在,它们的正常功能就足以掩盖整体
行。 条件 3:增殖能力要能支撑整个筛选周期 筛选通常需要细胞增殖 10–20 代(负向筛选)或更久。增殖过慢会拉长周期,且增加自发突变和漂变。 条件 4:细胞总量要够 这是最容易被低估的。计算方式: 所需细胞数 = 文库 gRNA 总数 × 覆盖倍数 ÷ 感染效率 以 7 万条 gRNA 的文库、500 倍覆盖、感染效率 30% 计:7万 × 500 ÷ 0.3 ≈ 1.2 亿个细胞。这只是起始感染阶段的量,后续每次传代还要维持覆盖度,实际消耗量还要乘以传代次数。 在做之前先算这笔账,如果细胞
,则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中,缓慢搅拌。 (3) 将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml,搅拌下逐滴加入酶溶液中。 (4) 用1M PH9.5碳酸缓冲液0.25ml,继续搅拌3?小时。 (5) 加0.2M赖氨酸0.25ml,混匀后,置室温2小时。 (6) 在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵,置4℃1小时。 (7) 3000rpm离心半小时,弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次,最后沉淀物溶于少量0.15M PH
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