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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
细菌裂解液(免超声)
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃避光保存,避免反复冻融。孵育缓冲液2-8℃保存
- 规格:
50ml/100ml
细菌裂解液(免超声)
产品概述
-
储存条件:
裂解液室温保存;
抑制剂-20℃保存。
细菌裂解液(免超声)有效期: 一年。
细菌裂解液(免超声)产品简介:
细菌裂解液采用优质原料配制,用于细菌菌体的裂解,用于细菌蛋白提取,裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western等下游实验。
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文献和实验细胞可以省略该步骤。 2) 将细胞悬浮液收集到离心管中,在2-8℃下以1000×g离心5分钟,然后吸去培养基,用预冷PBS洗涤细胞3次。 3) 加入适量的预冷PBS(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在6孔培养板(约1×106个细胞)中,每个孔加入150-250μL的PBS来重悬细胞。 4) 使样本在-20℃或-80℃条件和室温条件下反复冻融,重复冻融过程数次,直至细胞完全裂解。也可以使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞。 5) 2-8℃下以1500×g离心10分钟,去除细胞碎片,收集上清液
,约每克湿菌加3 mlTE 缓冲液。② 按超声处理仪厂家提供的功能参数进行破菌;10 000g 离心,15min ,分别收集上清液和沉淀。③ 分别取少量上清和沉淀,加入等体积的2× 凝胶电泳加样缓冲液,进行SDS -PAGE 。注意事项:超声破碎与声频、声能、处理时间、细胞浓度、菌种类型等因素有关,应根据具体情况掌握;超声波破菌前,标本经3 -4 次冻溶后更容易破碎。2 )包涵体的分离蛋白质在细菌中的高水平表达,常形成相差显微镜下可见到的细胞质颗粒,即为包涵体,经离心沉淀后可用Triton
散射信号。测定的结果用单参数直方图、双参数散点图、三维立体图和轮廓(等高)图来表示。对细胞进行分选的原理是,由超声振荡器产生高频振荡,使流动室发生振动,把喷嘴喷出的细胞液流断裂成一连串的均匀小液滴,有的液滴含有细胞。这些细胞在形成液滴前,光学系统已测定了它们的信号(代表细胞的性质),如果测得信号与所选定的要进行分选的细胞性质符合,或者说,如果发现了要进行分选的细胞时则在这个选定细胞刚形成液滴时,仪器给整个液流充以短暂的正或负电荷。当该液滴离开液流后,其中被选定细胞的液滴就带有电荷,而不被选定的细胞
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