笃玛 鸡胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD) ELI

鸡胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD) ELISA 试剂盒
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。
鸡胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD) ELISA 试剂盒
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
    
鸡胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD) ELISA 试剂盒
样品准备

1． 手术取出动物组织，并秤重以确定200毫克组织重量 
2． （选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管
3． （选择步骤）加入xx毫升 清理液（Reagent A）清洗1次
4． 即刻用刀片切碎组织
5． 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6． 加入预冷的xx毫升 清理液（Reagent A）
7． 涡旋震荡5秒，充分混匀
8． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约40至80下）
9． 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管
10． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为10000g
11． 移取500微升到新的1.5毫升离心管
12． 加入xx微升 稳定液（Reagent B），混匀
13． 放在冰槽里待测（注意：须1周内使用）