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笃玛 鸡γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS) ELISA

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  • DM-Ch54593
  • 上海
  • 2025年07月15日
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      体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等

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    • 适应物种

    • 应用

      ELISA

    • 检测方法

      ELISA

    • 供应商

      上海笃玛生物科技有限公司

    • 规格

      96T/48T

     鸡γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS) ELISA 试剂盒
    操作步骤
    1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
    500ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
    250ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
    125ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
    62.5ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
    31.25ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
    4. 配液:将30倍(48T的20倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    7. 温育:操作同3。
    8. 洗涤:操作同5。
    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
     鸡γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS) ELISA 试剂盒
    样品收集、处理及保存方法
    1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
    3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
    5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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