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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
141
- 英文名:
Octyl-β-Glucoside
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
- 规格:
1g
特别提示:包括辛甲基β葡糖苷在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:辛甲基β葡糖苷
英文名称:Octyl-β-Glucoside
产品货号:BTN131044
产品规格:1g
本产品是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。低分子量,可通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
除了辛甲基β葡糖苷,,我公司还供应以下相关产品:
名称:蛋*磷酸酶抑制剂混合液Ⅰ
货号:BTN80809
规格:1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋*磷酸酶,以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化,导致不同于正常生理状态的差异,影响实验结果。因此,加入外源性蛋*磷酸酶抑制剂,抑制磷酸化蛋白的去磷酸化,维持蛋白质的磷酸化状态,是Western Blotting、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质和蛋白激酶活性测定等研究不可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发。
产品特点:
1.即开即用,不需要单独购买每个成分然后再配制。
2.由5种蛋*磷酸酶抑制剂(钒酸钠、*化钠、钼酸钠、酒石酸钠、咪唑)组成,各成分的浓度经过精心优化。
3.抑制谱广,能特异性地抑制丝氨酸磷酸酶、苏氨酸磷酸酶、酪氨酸磷酸酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和ATP酶。
4.与各种细胞裂解液兼容。
5.使用简单,在细胞裂解液中按一定比例加入即可(根据蛋*磷酸酶决定,一般按1/100的体积比)。
6.适用于Western blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等试验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在临用前溶解本产品,并按1/100的比例加入到细胞裂解液中(1mL细胞裂解液中加入10μl)。注意:对蛋*磷酸酶含量特别丰富的组织,可以将加入比列提高到1/20-1/50。
2.后续处理按常规方法进行即可。
注意:避免反复冻融本产品,所以第一次溶化后,如果还有剩余,可将其分装成小份冻存,每次用多少取多少。
名称:丽春红染色液
货号:SNM446
规格:100ml
名称:双标阻断剂
货号:SNM480
规格:60ml
名称:蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)
货号:RFT197
规格:1ml|5×1ml
本品是一种用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(100mM AEBSF,1.5mM E64,2mM Pepstatin A,500mM Phenanthroline in DMSO)。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
真菌或酵母提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物,包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及金属蛋白酶抑制剂。
本产品使用便捷,通常以1:100的比例把蛋白酶抑制剂混合物加入裂解液中,即可用于真菌或酵母蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
本产品可以有效抑制真菌或酵母提取物中的各种蛋白酶活性,如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂;Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制剂;Phenanthroline是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
使用方法:
1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
名称:TEMED
货号:KFS076
规格:5ml
中文名称:N,N,N",N"-四甲基二乙*分子式:(CH3)2NCH2CH2N(CH3)2分子量:116.20
用于配制PAGE 胶等。TEMED 可以催化*硫酸铵产生自由基,从而加速丙*酰胺凝胶的聚合。
储存:4℃,避光,有效期12个月。
名称:RIPA裂解液(弱)
货号:SY0315
规格:100ml
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
本品为较为温和的裂解液(即RIPA裂解液(弱)),含有sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
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文献和实验又称β-D-葡糖苷醛酸酶。是作用于 D-葡糖醛酸的β -配糖体,使其葡糖醛酸苷键加水分解的酶的总称。 EC. 3. 2. 1. 31.在实验室中,为测定方便起见,在酚酞等游离后,是使用以容易比色定量的具有配质的葡糖醛酸苷为基质的方法。但因该酶对配质的特异性甚广,也能作用于以醇、类固醇、羧酸等为配质的β -D-葡糖醛酸苷。因酶来源不同而有相当大的差异。天然基质(真基质)到底如何,有时也不一定很清楚。高等植物、微生物中虽也有存在,但在动物中,该酶却几乎存在于所有的组织中,除了血浆等体液中常
[1]含于扁桃、桃子、杏、枇杷等种子中的一种β -葡糖苷酶。苦杏仁酶的名称,是因为其作用见于种子的乳浊液( emulsion)中,由冯利毕格( J. F. von Liebig, 1837年)命名的,以前所谓的苦杏仁酶就是从水解苦扁桃得到的苦杏仁苷 [2]也作为从植物体得到的主要含β -葡糖苷酶等糖苷酶的粗酶制剂的一般名来使用( B. Helferich, 1935)。
型,广泛分布于高等植物中,在未成熟的果实或休眠种子里含量很高。也以葡糖苷的形态存在。除促进器官脱落外,还能抑制枝条的生长和种子、球根、顶芽的发芽。若连续对叶施用此酸,即产生休眠芽,对休眠形成起主要作用。此外还有迅速关闭气孔的作用。一旦植物体处于缺水状态,即可迅速合成脱落酸而关闭气孔,因此也与水分代谢的调节有关。是一种倍半萜,在生物体内是经甲羟戊酸的途径合成的。它是广泛分布于植物中的生长抑制物——抑制剂β( inhibitorβ)的主要成分。
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