蛋白酶抑制剂混合物（含EDTA）

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该

植物叶蛋白的提取

它的蛋白溶液可以冻存)与Zwittergent 等双性离子去垢剂； ③还原剂：DTT、DTE、TBP、Tris-base 等；④蛋白酶抑制剂及核酸酶：EDTA、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitor cocktails)等，如为了去除缓冲液中存在的痕量重金属离子，可在其中加入0.1～5mmol/LEDTA，同时使金属蛋白酶失活。 三、 仪器和试剂 仪器 离心机、移液器、研钵、离心管、冰箱。 试剂 1. 20mL 样品提取缓冲液：2.5mL

做 ChIP 的心得体会

time PCR 之前都要把 sample 离心保证取样的准确。 11、1~10ul 的*取 3ul 以上才比较准确，所以考虑好自己 PCR 反应体系的配置。 12、一个 ChIP 一般需要 3~4 天的时间，其中有几个步骤是可以停下来的： 1）细胞收集：用含蛋白酶抑制剂的 PBS 洗涤离心，去上清的细胞收集液可置 -80° 冻存； 2）用 SDS 重悬细胞后可置 -80° 冻存； 3）sonication 结束，离心后的上清置新的离心管后可 -80° 冻存； 4）reverse cross