- ￥200 - 3230
- 百奥莱博
- 北京
- BTN81220-EUR
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
Column Insect RNAOUT
- 库存：
765
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
50次
试剂盒特点：
- 操作简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。
- RNA纯度高，平均OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数昆虫中的多糖污染。
- 适用于各种昆虫组织，每100mg组织能提取到20～30μg总RNA。
- 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
- 一站式，提供RNase-free的样品收集管。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50mL |
| 溶液B | 15mL |
| 溶液C | 50mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| RNA洗脱液 | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：常温运输，4℃保存(RNA洗脱液最好4℃保存)，有效期一年。
使用方法：
- 将50～300mg昆虫组织放入10～15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5～20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎昆虫组织，砚磨完后加入1mL溶液A。
注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。 - 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。
- 在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
- 室温12000rmp离心3～5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。
- 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
- 加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。
- 将一半的溶液转移到离心吸附柱中，12000rmp室温离心半分钟，弃穿透液。
- 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中，12000rmp室温离心半分钟，弃穿透液。
- 加0.7mL通用洗柱液，室温12000rmp离心半分钟，弃穿透液。
- 加0.3mL通用洗柱液，室温12000rmp离心半分钟，弃穿透液。此步可以省略。
- 室温12000rmp离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
- 将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中，加入50～100μL RNA洗脱液，室温放置1～2分钟。
- 12000rmp室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
- RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子。
注意：大部分昆虫的28S RNA被切割成两个小的片段，彼此用氢键相连，所以在甲醛变性胶中，没有28S带出现。 - RNA产量产率测定：将5～10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5～8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
- RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8～2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 新鲜血液样品（ 200 μl ）2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物样品（10-20 mg），研钵，液氮2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP419） ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 涡旋振荡器，台式低温离心机实验准备-试剂盒准备：第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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