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兔抗鸡IgY,IgG(血清型)

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    • 抗体英文名

      Rabbit anti-chicken IgY,IgG(serum type)

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      大量

    • 供应商

      佰泰科

    • 抗原来源

    • 是否单克隆

      多克隆

    • 规格

      1mg

    高效价的兔抗鸡IgY血清,通过亲和层析纯化,经低温无菌过滤制成。
    兔抗鸡IgY纯品溶于0.01mol/L磷酸盐缓冲液中,PH7.4、含0.14mol/L氯化钠,未加防腐剂。
    本抗体具备效价高(11000000)、特异性好;与人IgG、鼠IgG 等均无交叉反应,可用于ELISA,免疫组化及蛋白印迹检测。
    聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度>95%。
    长期-20℃(避免反复冻融)

    方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

    1. 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
    2. 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或者RT封闭)封闭1小时。弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。

    3. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
    4. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
    5. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
    6. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
    7. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
    方法二 用于检测未知抗体的间接法:
    用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
    加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。
    同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
    其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

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