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- 百奥莱博
- GL1378-LBR
- 北京
- 2025年07月11日
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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—20℃
特别提示：包括PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×)
产品规格：5ml
用途：常规的非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样
注意事项：含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不的巯基乙醇,其余成分还Tris-HCl缓冲液等。
保存：—20℃,12个月
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文献和实验关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
菌体加4×上样缓冲液煮沸, 12.5% SDS PAGE 分析。 大量表达时, 于1 L 4×YT培养基中摇至A600=0.5～2.0时, 加IPTG(终浓度0.5 mmol/L)诱导1～4 h。 超声破菌, 12 000 g离心除去细菌碎片后, 裂菌上清液用GST亲和树脂纯化(参照BD Biosciences Clontech 使用手册p1-15), 纯化融合蛋白质GST-S600经凝血酶切, 酶切条件为： 1×PBS, 室温反应16 h。 酶切后样品经制备型PAGE电泳分离, 用KCl染色
：高脂实验样本该如何处理？ A1：高脂实验样本含有脂肪，不是均质溶液，若直接上样，会影响抗原抗体的结合，导致测值不准确。建议先大转速（5000×g）离心，静置 10min 后，取中层较澄清液体，再用大转速（≥5000×g）离心一次，取中下层清液，用于检测。 Q2：实验样本稀释方案是怎样的？ A2：试剂盒检测范围不等同于实验样本中待测物的浓度范围。实验前，建议通过相关文献预估实验样本中待测物的浓度，并通过预实验确定实验样本的实际浓度情况。 如果您的检测样本需要稀释，参考稀释方案如下： 稀释 100
时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
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