非特异结合性封闭液试剂盒

免疫组化常见十大问题与解析

不完全，若存在，需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 （5）抗原修复不完全：对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合。 （6）细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应：可加入组织透化步骤，进行细胞膜或核膜的透化。 （7）试剂盒保存不当：请于 4℃ 进行保存，勿室温防止过长时间。 （8）封闭时间过长：若使用封闭液进行封闭，请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2：免疫组化染色弱怎么办？ （1）抗体浓度过低，孵育时间过短：可提高抗体浓度，进行抗体4℃过夜孵育。 （2）组织

蛋白免疫印迹（Western Blot）技术手册

5分钟，大量的水洗膜直至水变清无色蛋白条带清晰，（膜也可以用TBST或水重新洗后再进行染色）PVDF膜需用甲醇再活化后用TBST洗后进行封闭。 9.  膜的封闭 为防止一抗或/和二抗与膜的非特异性结合产生的高背景，因此需要进行膜的封闭， 传统上有两种封闭液：脱脂奶粉或BSA，脱脂奶粉成本低但不能用于磷酸化蛋白（因脱脂奶粉含有酪蛋白，该蛋白本身就是一种磷酸化蛋白），使用脱脂奶粉会结合磷酸化抗体从而易产生高背景。 某些抗体用BSA封闭时因不明原因可能会

WB 实验，你都碰到过哪些奇葩的条带

相信很多人在做 Western blot 实验时，会遇到各式各样奇怪的现象，为了让大家少走弯路，下面就跟大家来分享一下实验过程中会出现哪些现象，是什么原因，如何来解决。以下列举的情况可都是我们的实验员在多次实验中所积累的真实经验，内容文字少，全是干货。1. 出现黑点或黑斑原因：试剂污染，抗体结合到封闭剂解决方法：使用新鲜配置的试剂；过滤封闭液；选用其他类型封闭液2. 条带中出现边缘规则的白圈原因：转膜时膜和胶中间有气泡，或抗体在膜上未均匀分散解决方法：制备转膜凝胶时用玻棒赶去气泡；使用摇床孵育