溶酶体染色试剂盒(橙色荧光) BBcellProbe L04

免疫荧光有结果 WB 却没条带？问题可能出在这一步…

实验室中时常听到这样的困惑，「明明通过免疫荧光（IF）能看到目的蛋白表达在细胞核膜上的表达，但为什么不论用总蛋白还是核蛋白进行 WB 检测，都无法检测到目的蛋白？」 类似这样的问题，你是否也深有感触？ 实际操作过程中，是否遇到过免疫荧光有结果而蛋白印迹却没条带的情况？什么原因导致了这种情况？又该如何处理？ 一、IF & WB 免疫荧光（IF）和免疫印迹（WB）都是利用抗原和抗体的特异性结合对目的蛋白质进行检测。IF 采用抗体和荧光检测固定细胞或组织中目的

荧光的淬灭及抗淬灭

没食子酸盐(propyl gallate，NPG)、1，4-二偶氮双环[2，2，2)-辛烷(1，4-diazobicyelo(2，2，2)-octane，DABCO)等。其中p-苯二胺是最有效的抗淬灭剂，但由于对光和热均有较强的敏感性，且具有毒性，因而限制了在体内的应用。理想的PPD抗淬灭剂混合液配方是：9份甘油、1份PBS和浓度在2～7retool/L之间的PPl)，最终pH为8．5～9．0。n-丙基没食子酸盐无毒性，对光和热稳定，但抗荧光漂白的效果不如PPl)，可用于体内研究。推荐浓度为3～

荧光定量 FAQ 专题—前期准备

充分的准备是实验成功的关键，那么，qPCR 实验需要提前做好哪些了解呢？ 试剂的储存条件 市面上大多数 qPCR 试剂推荐 - 20 ℃ 避光长期储存。 Vazyme 的 ChamQTM 和 AceQ® 两个系列的 qPCR Master Mix，长期储存应置于 - 20 ℃ 避光，解冻后可于 4 ℃ 短暂存放；避免反复冻融。 原始模版稀释倍数 尽量选择 Ct 值落在 15 - 28 范围的稀释倍数作为原始模板稀释度。 反应体系与次数 推荐 20 μl 体系，Vazyme