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- WE0319-XQO
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
360
- 英文名：
EDTA Buffer(50×)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2～8℃
特别提示：包括EDTA缓冲液(IHC抗原修复液，50×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：EDTA缓冲液(IHC抗原修复液，50×)
英文名称：EDTA Buffer(50×)
产品规格：100ml
福尔马林固定时，组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此，对于石蜡切片，要求在进行IHC染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。EDTA缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC 抗原修复液。有部分抗原用EDTA缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。
注意事项：
1、请使用足量的修复液，修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时，操作请务必谨慎，尤其高压修复时，保证锅内有足量的修复液，以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间，如组织粘片不牢，容易掉片，请酌情减少修复时间。
操作步骤：
1、高压热修复：根据需要量，取适量本品，稀释50倍后即可使用。将稀释好的修复液加入高压锅内，将待修复切片浸于其中，保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内，再置于锅内修复液浴中)，盖上压力锅盖，加热至均匀喷汽，从喷汽开始计时，1~2 分钟后压力锅离开热源，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水冲洗后，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大，是最常用的热修复法。
2、微波热修复：根据需要量，取适量本品，稀释50倍后即可使用。将切片放入盛有修复液的容器中，置微波炉内加热至沸腾，停止加热，使容器内液体温度下降保持在95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意：请根据具体机型酌情设置条件，务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水冲洗后，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴，但小于高压修复。
3、沸水浴热修复：根据需要量，取适量本品，稀释50倍后即可使用。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中，并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中，电炉上加热煮沸，从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温，蒸馏水冲洗，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。
储存条件：2～8℃
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文献和实验过硫酸胺 0.1 g ，加超纯水1.0 mL 溶解后，4 ℃ 保存，保存时间为 1 周。（-20 ℃长期保存） 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中，定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS（2L） NaOH 调 pH 值至 7.4，定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后，分装于 1.5 mL 离心管中，4 ℃ 可保存数周，-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存，1 次溶液可重复
：高脂实验样本该如何处理？ A1：高脂实验样本含有脂肪，不是均质溶液，若直接上样，会影响抗原抗体的结合，导致测值不准确。建议先大转速（5000×g）离心，静置 10min 后，取中层较澄清液体，再用大转速（≥5000×g）离心一次，取中下层清液，用于检测。 Q2：实验样本稀释方案是怎样的？ A2：试剂盒检测范围不等同于实验样本中待测物的浓度范围。实验前，建议通过相关文献预估实验样本中待测物的浓度，并通过预实验确定实验样本的实际浓度情况。 如果您的检测样本需要稀释，参考稀释方案如下： 稀释 100
不完全：使用正常山羊血清或 1%～5% BSA 封闭 1h。 （5）离子相互作用造成的背景：降低抗体稀释液的离子强度。 （6）切片或细胞过于干燥或孵育温度过高：实验过程中请保持切片处于湿润状态，一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 （7）内源性过氧化物酶残余：适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 （8）样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久：样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4：为什么会出现非特异性染色，如何避免？ （1）抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色：由于本试剂盒使用
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