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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
390
- 英文名:
SDS-PAGE Loading Buffer(non-Reducing,5×)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别提示:包括SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×)
英文名称:SDS-PAGE Loading Buffer(non-Reducing,5×)
产品规格:5×2ml
SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×)是以*酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于非还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。
注意事项:
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本品不含还原剂如巯基乙醇或DTT。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、将SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×)与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
2、将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5分钟。
3、待蛋白样品充分变性后冷却至室温,以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4、离心后,以取适量上清,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内。进行常规电泳。
储存条件:-20℃
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文献和实验:高脂实验样本该如何处理? A1:高脂实验样本含有脂肪,不是均质溶液,若直接上样,会影响抗原抗体的结合,导致测值不准确。建议先大转速(5000×g)离心,静置 10min 后,取中层较澄清液体,再用大转速(≥5000×g)离心一次,取中下层清液,用于检测。 Q2:实验样本稀释方案是怎样的? A2:试剂盒检测范围不等同于实验样本中待测物的浓度范围。实验前,建议通过相关文献预估实验样本中待测物的浓度,并通过预实验确定实验样本的实际浓度情况。 如果您的检测样本需要稀释,参考稀释方案如下: 稀释 100
(十二烷基硫酸钠)50 mM Tris-HCl pH 8.0蛋白酶抑制剂Tris-HCl 缓冲液20 mM Tris-HCl pH 7.5蛋白酶抑制剂●电泳、转膜、封闭缓冲液Laemmli 2× 缓冲液/上样缓冲液4% SDS10% 2-巯基乙醇20% 甘油0.004% 溴酚蓝0.125 M Tris-HCl测定 pH 并调节至 pH 6.8。电泳缓冲液(Tris-甘氨酸/SDS)25 mM Tris 碱190 mM 甘氨酸0.1% SDS测定 pH,pH 应为约 8.3。必要时进行调节。转膜缓冲液
。 Q:检测凋亡用的细胞能否固定? A:甲醛固定液会造成结果假阳性,因此用于 Annexin V 凋亡检测的细胞不能进行固定。 需要注意的是,Annexin V 检测的样本为外周血时,勿使用含有多聚甲醛等固定液成分的红细胞裂解液来处理细胞。 Q:有没有更好的办法处理贴壁细胞,来做流式凋亡实验? A:检测贴壁细胞时,若消化时间不易控制,建议用 Accutase 细胞消化液,对细胞损伤小且不会改变细胞膜上 PS 的分布。 Q:Annexin V 系列有很多种不同组合试剂盒,该如何选
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