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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4~25℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
SDS-PAGE Gel Preparation Kit
- 库存:
762
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京SDS-PAGE凝胶配制试剂盒品牌在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京SDS-PAGE凝胶配制试剂盒品牌
编号:SY0359
品牌:百奥莱博
规格:30~50gels
英文名:SDS-PAGE Gel Preparation Kit
蛋白电泳经常使用聚丙*(代"烯")酰胺凝胶来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙*(代"烯")酰胺单体和N,N-亚甲基双丙*(代"烯")酰胺(甲叉丙*(代"烯")酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶,大大简化了制胶过程,本试剂盒可配制30-50块常规大小的凝胶。
产品组份:
| 组分名称 | 规格 | 保存方式 |
| 30%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺,29:1 | 100ml | 4℃避光 |
| 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液,pH8.8 | 70ml | 4℃ |
| 4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液,pH6.8 | 30ml | 4℃ |
| APS 过硫*(代"酸")铵 | 0.5g | 4℃~25℃ |
| TEMED 四甲基二乙*(代"胺") | 0.5ml | 4℃~25℃避光 |
储存条件:4~25℃,有效期6个月。
注意事项
1) 丙*(代"烯")酰胺溶液和TEMED有毒,请适当防护。
2) APS溶液不稳定,当配制成10%溶液后,分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间,以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长,需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS。
3) TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。
4) 凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMED、APS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下,可通过适当调节TEMED以及APS的用量,控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。
5) 温度较低时,4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育,并在完全溶解和混匀后使用。
6) 凝胶配制过程,特别是液体混匀步骤,需尽量避免气泡的产生。
7) 在分离胶上层进行水压时需小心操作,加水速度不宜过快。
8) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1.根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】;
2.按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶,制胶程序如下:
2.1 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
2.2 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免气泡产生;
2.3 在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液,对于mini胶,分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层,从而压平凝胶表面;
2.4 静置30-60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面,表面凝胶已聚合;
3.按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶,制胶程序如下:
3.1 去除覆盖在分离胶上的水层。
3.2 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
3.3 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3.4 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
3.5 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3.6 静置10-20min,等待浓缩胶聚合。
3.7 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
3.8 可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液【可选】,然后进行上样和后续的常规电泳操作。
附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%凝胶 | 50-150kD |
| 8%凝胶 | 30-90kD |
| 10%凝胶 | 20-80kD |
| 12%凝胶 | 12-60kD |
| 15%凝胶 | 10- 40kD |
附表2. 不同浓度SDS-PAGE分离胶配制体系
| 分离胶浓度 | 凝胶体积(ml) | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 蒸馏水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS 分离胶缓冲液,pH 8.8 |
10%APS | TEMED | ||
| rowspan=6>6% | 5 | 2.7 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10 | 5.4 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15 | 8.1 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20 | 10.8 | 4.0 | 5.0 | 0.2 | 0.016 | |
| 30 | 16.2 | 6.0 | 7.5 | 0 .3 |
0.024 | |
| 50 | 27.0 | 10.0 | 12.5 | 0.5 | 0.040 | |
| rowspan=6>8% | 5 | 2.37 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10 | 4.7 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15 | 7.1 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20 | 9.5 | 5.3 | 5.0 | 0.2 | 0.012 | |
| 30 | 14.2 | 8.0 | 7.5 | 0.3 |
0.018 | |
| 50 | 23.7 | 13.3 | 12.5 | 0.5 | 0.030 | |
| rowspan=6>10% | 5 | 2.03 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 4.07 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 6.1 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 8.1 | 6.7 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 12.2 | 10.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
| 50 | 20.3 | 16.7 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
| rowspan=6>12% | 5 | 1.7 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 3.4 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 5.1 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 6.8 | 8.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 10.2 | 12.0 | 7.5 | 0.3 |
0.012 | |
| 50 | 17.0 | 20.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
| rowspan=6>15% | 5 | 1.2 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 2.4 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 3.6 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 4.8 | 10.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 7.2 | 15.0 | 7.5 | 0.3 |
0.012 | |
| 50 | 12.0 | 25.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
附表3. 5%SDS-PAGE浓缩胶配制体系
| 凝胶体积(ml) | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 蒸馏水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS 浓缩胶缓冲液,pH 6.8 |
10%APS | TEMED | |
| 2 | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4 | 2.28 | 0.68 | 1.0 | 0.04 | 0.004 |
| 6 | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8 | 4.56 | 1.36 | 2.0 | 0.08 | 0.008 |
北京SDS-PAGE凝胶配制试剂盒品牌正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·IPTG
编号:SY0276
英文名称:Isopropyl β-D-thiogalactoside
规格:5g
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质,常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等。当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。
产品性质:
中文名称:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
英文名称:Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside;
CAS:367-93-1
分子式:C9H18O5S
纯度:≥98%
级别:Ultra Pure
杂质:≤0.1% Dioxane
外观:白色粉末
分子量:238.30
产品使用
用去离子水充分溶解IPTG粉末,配制100 mM的储存液,0.22 μm过滤除菌。分装成1ml小份,-20℃冻存。
对于蓝白斑筛选,常用工作浓度是0.1-0.5 mM(LB培养基)。
注意事项
1)含有IPTG的培养基4℃避光保存,须在1周内使用。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
·核糖核酸酶A(10mg/ml)
编号:SY0005
英文名称:RNase A (10mg/ml)
规格:1ml
RNase A (Ribonuclease A,即核糖核酸酶A),分子量为13.7 kDa(单体),可在C和U残基位置特异性降解单链RNA。该酶可以切割核苷酸5’-核糖与邻近嘧啶核苷3’-核糖上磷酸基团之间的磷酸二酯键,产生的2’, 3’-环磷酸可以水解成相应的3’-核苷磷酸盐。产品不含DNase和蛋白酶,使用前无需热处理。
可用于质粒和基因组DNA制备;除去重组蛋白抽提物中的RNA;核糖核酸酶保护分析;DNA或RNA单碱基突变图谱绘制。
推荐工作浓度(1-100 μg/ml),因应用类型的不同而异。
该酶在多种反应条件下均有活性。低盐离子浓度时(0-100 mM NaCl),RNase A可以切割单链RNA、双链RNA以及RNA/DNA杂合子中的RNA;然而,当NaCl浓度大于300 mM时,RNase A则特异性切割单链RNA。
储存条件:-20 ℃。
北京SDS-PAGE凝胶配制试剂盒品牌关键词:SDS-PAGE Gel Preparation Kit,SDS-PAGE凝胶配制试剂盒,SY0359
PY02-155 胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE) 250克
DEAE葡聚糖凝胶A-25 AdoMet 12609-80-2
8002-43-5 蛋黄卵磷脂/卵磷脂(蛋黄)
L-甲状腺素* DAB 25416-65-3
NF-239 羊抗人IgG荧光抗体
葡萄糖酸* Dimidium bromide 299-28-5
CYB168007 标准大牛血清 100ml/瓶
ARB13781 豚鼠内皮素1(ET-1)酶免分析 Guinea pig endothelin 1,et-1 ELISA KIT
H0201 兔血浆(去红细胞、无菌过滤)
BL0810 HRP标记羊抗人白蛋白抗体
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北京SDS-PAGE凝胶配制试剂盒品牌关键词:SDS-PAGE Gel Preparation Kit,SDS-PAGE凝胶配制试剂盒,SY0359
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京SDS-PAGE凝胶配制试剂盒品牌。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验公司名字暂略(其实主要的还是那几家),但是给出了参考价格,方便大家事先做好预算,好跟老板汇报。 好,下面是常用的试剂 我尽量按照做western的顺序来讲 一、 样品制备 货号 名称 规格 单价 P0013 Western及IP细胞裂解液 100ml 158.00元 ST506 PMSF(100mM) 10ml 92.00元 P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒 200次 139.00元 二、蛋白电泳 P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 1盒 139.00元
。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制,也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配 胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋 白上样缓冲液可以减小上样
的Western及IP细胞裂解液,可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制,也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配 胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE
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