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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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203
- 英文名:
Efficient & HiFi DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别提示:包括DNA聚合酶(高保真)(高效率)(双平端克隆)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA聚合酶(高保真)(高效率)(双平端克隆)
英文名称:Efficient & HiFi DNA Polymerase
产品规格:200U|1000U
本品是一种超高性能DNA聚合酶,它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。
本品扩增速度极快,扩增小于6kb的DNA片段时,延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。由于其超快的扩增速度,可以显著缩短PCR扩增所需的时间。
本品是一种高保真DNA聚合酶,不仅可以非常高效地催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应,它同时还具有3’至5’的外切酶活性,它的错误发生概率比Taq酶要低52倍,比pfu酶要约低6倍。
本品扩增长度长,可以达到12kb。非常适合长片段DNA的扩增,扩增出来的片段可以轻松达到12kb,更长片段的扩增效果未经测试。本品可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA片段的准确扩增,因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。
以λDNA为模板,PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图如下
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。扩增出来的DNA片断为双平端,可以直接用于双平端克隆。
来源:通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 74℃
.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v) glycerol。
失活或抑制:酚*仿抽提可以使本酶失活。
注意事项:PCR反应非常灵敏,在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照。
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合
的DNA,70°C温育5分钟,冰上冷却后,再加入20个单位的T4多聚核苷酸激酶,37°C温育30分钟。 怎样才能提高PCR产物平滑末端的连接效率? 载体应该去磷酸化以降低自身环化,插入片段的5"末端应具有磷酸基。其它提高连接效率的方法还有:降低ATP在连接反应缓冲液中的浓度,增加插入片段与载体的比例或使用快速连接试剂盒(NEB #M2200)。另外,可使用平端克隆试剂盒(NEB #E0103)。 VentR或Deep VentR DNA聚合酶产生平滑末端,可是我要
耐热DNA聚合酶常见问题(Thermpholic Polymerases FAQ)
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