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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海研卉生物科技有限公司
- 规格:
200ml/瓶
TBD LTS1092PK 小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 LTS1092PK
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文献和实验细胞筛网置于培养皿中,取小鼠脾脏放置于筛网中,加入 5ml 达优小鼠淋巴细胞分离液,对脾脏轻轻进行研磨(注:此步操作要快,避免分离液蒸发); 2. 把悬有脾脏细胞的的分离液立即转移至 15ml 离心管中,随后在分离液上层轻轻覆盖 500-1000μl 的 RPMI1640 培养基(保持分离液与培养基分界明显); 3. 室温,水平转子 800g 离心 30 分钟,设置离心机为缓升缓降; 4. 离心结束后吸出淋巴细胞层(白膜层),加入 10ml RPMI1640 洗涤一遍细胞,250g 离心 10
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息: MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit(BioLegend, Cat#480009),阴性分选试剂盒2.检测仪器型号:BD LSRⅡ3.样本:正常人外周血4.分选前后检测相关产品:PE-CD4(Biolegend, Cat# 317410)5.实验过程(1)采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。(达优,Cat#DKW-KLSH-0100
液:用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液(1000×)RPMI 1640 完全培养基:RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏,研磨成单细胞悬液,用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞,将细胞过 40 μm 细胞滤网后,进行细胞计数。样本清洗液洗涤(可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替),1 500 rpm 离心 5 min,用 PBS 重悬,调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE
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