外泌体(Exosomes)提取试剂盒-细胞培养上清

外泌体专用培养基 VS 去外泌体血清，谁赢了？

培养基，添加新培养基（50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基）；   3. 阶段培养二：待细胞在梯度培养一中生长汇合度约为 70～80% 时，移去原有的 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基；   4. 使用 1X PBS 溶液将细胞润洗 2～3 次；   5. 加入外泌体专用无血清培养基继续培养 24～48 h，待细胞汇合度到 90%～100% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌体提取实验。   *注：若使用 DMEM、1640 等常规培养基，会导致培养的细胞

外泌体大规模提取的秘密都在这了

远远比常规试剂盒提取高，更好的保留外泌体的活性和形态； 大规模提取是有参考的解决方案的，这两篇文献很好的做了阐释。 关键步骤 [1]： ● 收集条件培养基（CM）：收集神经母细胞瘤 N2a 和成肌细胞 C2C12 的培养基，经过低速离心和 0.22 μm 过滤去除大颗粒和细胞碎片。 ● 处理大体积培养基：对于大体积培养基（50 ml 至 200 mL），使用切向流过滤（TFF）系统进行浓缩和透析，然后加载到结合-洗脱分子筛层析（BE-SEC）柱上进行纯化。 ● 分离 EVs：根据 280 nm

如何用外泌体「套路」申请关于国自然？

过滤孔，导致膜的寿命减短，分离效率较低。同时，外泌体会粘附在膜上，导致产量降低。 免疫磁珠法：用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受 pH 和盐浓度影响，不利于下游实验。 试剂盒分离法：目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样，提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高，且外泌体的得率和纯度一般，不是性价比高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。 五、如何鉴定外泌体